Астра ш: Opel Astra ( ) H / Opel Zafira B


0
Categories : Разное

Содержание

Opel Astra H (Опель Астра H) универсал, caravan

Opel Astra Family универсал — это прекрасное сочетание элегантности и многофункциональности.

Быть водителем Астра Фамили означает, что вы привыкаете к более высоким стандартам, которым другие автомобили данного класса просто не могут соответствовать.

  • Opel Astra Family универсал Essentia
  • Opel Astra Family универсал Enjoy
  • Opel Astra Family универсал Cosmo

Дизайн

Обладая выразительным динамичным дизайном и сверхдлинной колесной базой, универсал Opel Astra Family является воплощением спортивной элегантности и многофункциональности.

Длинная колесная база, короткие свесы и выразительные колесные арки делают универсал Опель Астра Фамили универсал мощным и элегантным одновременно.

Все линии этого универсала были тщательно выверены, чтобы подчеркнуть его спортивную динамику.


Интерьер и оснащение салона

В салоне универсала Опель Астра Фамили вы почуствуете себя как дома. На передней панели эргономично расположены все элементы управления высококачественными информационно-развлекательной системой и системой кондиционирования воздуха.

Приборы отлично читаются, а клавиши управления на рулевом колесе обеспечивают водителю максимальное удобство и инстинктивную легкость использования. Высококачественные материалы отделки салона позволяют Вам чувствовать себя в Opel Astra Family универсал как дома.


Технические характеристики

Универсал Opel Astra Family предлагает на выбор два бензиновых двигателя, способных удовлетворить любые требования в отношении расхода топлива и производительности.

Каждый Опель Астра Фамили универсал обладает уникальной динамикой, и Вы можете выбрать именно тот вариант мощности, который подходит Вашему стилю вождения. Все двигатели полностью соответствуют стандарту на выбросы Евро 4.

Двигатель объемом 1,6 л. мощностью 85 кВт (115 л.с.) имеет изменяемые фазы газораспределения, обеспечивающие более высокие характеристики и отличную экономичность.

Если Вам необходима более высокая мощность, Вы можете выбрать 1,8-литровый двигатель мощностью 103 кВт (140 л.с.), который также доступен с 4-ступенчатой автоматической трансмиссией.


Комплектации

Подберите для себя универсал Opel Astra Family по вкусу. Выберите один из трех привлекательных уровней отделки.

  • Фронтальные и боковые подушки безопасности
  • Система крепления детских кресел ISOFIX
  • Круиз-контроль
  • Центральная консоль Piano Paint
  • Противотуманные фарыo
  • Климат-контроль

Где обслужить?

Автосервис «АМ Сервис», является Официальным сервисным партнером компании Дженерал Моторз (GM/Opel) и выполняет весь комплекс работ по обслуживанию и ремонту любой сложности автомобилей марки Опель (Opel) по самым выгодным ценам в г. Санкт-Петербург.

Как Официальный сервисный партнер, компания дает фирменную гарантию на выполненные работы и установленные запасные части.

Opel Astra 2004 — 2010

Вы смотрите поколение, которое уже отсутствует в продаже.
Больше информации о модели можно найти на странице последнего поколения:

Последнее поколение Opel Astra

Все поколения Opel Astra

Крупнейшая японская автомобилестроительная компания Тойота с 2012 года становится лидером продаж автомобилей, опередив в этом Фольксваген и Дженерал Моторс. Одной из популярных моделей бренда является Тойота Камри, выпускаемая с 1982 года и пережившая на сегодняшний день несколько поколений, с 2011 года и по данное время выпускается седьмое поколение автомобилей. Первоначально машины были компактными по размеру, более поздние модели выросли, чтобы соответствовать среднему классу. В зависимости от места производства и оснащенности может относиться и к бизнес-классу, а в эксклюзивном исполнении – к премиум классу.

Первоначально под капотом Камри находился 1,8-литровый двигатель, развивавший мощность в разное время от 90 до 115 лошадок. Примерно через год появился уже 2-литровый двигатель, развивающий 120 лошадиных сил. Чаще всего они комплектовались 4-ступенчатой АКПП или 5-ступенчатой МКПП. В США поставлялись автомобили, где гидроусилитель руля был уже в стандартном варианте, Toyota считала американский рынок для себя приоритетным. Поэтому для придирчивых американцев даже экстерьер меняли, делая его чуть более брутальным.

Следующее поколение Toyota Camry вышло в 1986 году и выпускалось до 1991 года. Размеры практически не изменились, техническое оснащение тоже. А вот внешность стала более современной благодаря скругленным углам. Но уже через год старые двигатели сменили новые, более мощные, один из которых двухлитровый 3S-FE, развивающий мощность 136 лошадиных сил стал настоящей легендой. Появились также турбодизели: двухлитровый и 2,5 литра.

Камри третьего поколения выросла в размерах и круто поменяла внешность. Автолюбителям предлагались варианты кузова: седан, универсал и купе. В универсале можно разложить еще одно сиденье лицом против хода автомобиля. Новые двигатели, ремни безопасности с преднатяжителем, подушки безопасности по бокам. Двигатель 5S-FE экономичный, надежный, резвый.

Последнее поколение Camry имеет актуальный на сегодня, стильный дизайн, мощные, выразительные, динамичные формы, высокий уровень комфортности. Обновилась оптика, зеркала подогреваются и складываются. Просторный салон с отличной звукоизоляцией, многофункциональная штатная магнитола с цветным дисплеем, климат-контроль в любой комплектации.

Двигатели: бензиновые 2,5 литра (мощность 181 л.с.) и 3,5 литра (мощность 277 лошадей) в комплексе с 6-ступенчатой АКПП, разгоняющиеся до 218 километров в час.

Toyota Camry – одна из самых популярных моделей компании постоянно совершенствуется: обогащается оснащение, повышается безопасность, улучшается динамика.


Технические характеристики Opel Astra поколения H

седан

Городской авто

  • ширина
    1 753мм
  • длина
    4 587мм
  • высота
    1 447мм
  • клиренс
    165мм
  • мест
    5
Двигатель Название Топливо Привод Расход До сотни Макс. скорость
1.6 MT
(115 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 5,3 / 8,8 11,7 с 191 км/ч
1.6 MT
(115 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 5,3 / 8,8 11,7 с 191 км/ч
1.6 MT
(115 л.с.)
essentia АИ-95 Передний 5,3 / 8,8 11,7 с 191 км/ч
1.6 AMT
(115 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 5,1 / 8,6 12,7 с 192 км/ч
1.6 AMT
(115 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 5,1 / 8,6 12,7 с 192 км/ч
1.8 MT
(140 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 5,9 / 10 10,2 с 207 км/ч
1.8 MT
(140 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 5,9 / 10 10,2 с 207 км/ч
1.8 AT
(140 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 6,2 / 10,5 11,4 с 188 км/ч
1.8 AT
(140 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 6,2 / 10,5 11,4 с 188 км/ч

хэтчбек 3-дв.

Городской авто

  • ширина
    1 753мм
  • длина
    4 290мм
  • высота
    1 435мм
  • клиренс
    165мм
  • мест
    5
Двигатель Название Топливо Привод Расход До сотни Макс. скорость
1.6 MT
(115 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 5,2 / 8,7 11,6 с 193 км/ч
1.6 MT
(115 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 5,2 / 8,7 11,6 с 193 км/ч
1.6 AMT
(115 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 5 / 8,5 12,6 с 194 км/ч
1.6 AMT
(115 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 5 / 8,5 12,6 с 194 км/ч
1.9 CDTi MT
(120 л.с.)
enjoy ДТ Передний 4,7 / 7,2 10,4 с 196 км/ч
1.8 MT
(140 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 5,8 / 9,9 10,1 с 210 км/ч
1.8 MT
(140 л.с.)
sport АИ-95 Передний 5,8 / 9,9 10,1 с 210 км/ч
1.8 AT
(140 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 6,1 / 10,4 11,2 с 190 км/ч
1.9 CDTi MT
(150 л.с.)
cosmo ДТ Передний 4,7 / 7,2 8,9 с 210 км/ч
2.0T MT
(200 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 7,1 / 13,1 7,8 с 234 км/ч
2.0T MT
(200 л.с.)
sport АИ-95 Передний 7,1 / 13,1 7,8 с 234 км/ч

хэтчбек 5-дв.

Городской авто

  • ширина
    1 753мм
  • длина
    4 249мм
  • высота
    1 460мм
  • клиренс
    165мм
  • мест
    5
Двигатель Название Топливо Привод Расход До сотни Макс. скорость
1.6 MT
(115 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 5,2 / 8,7 11,7 с 191 км/ч
1.6 MT
(115 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 5,2 / 8,7 11,7 с 191 км/ч
1.6 MT
(115 л.с.)
essentia АИ-95 Передний 5,2 / 8,7 11,7 с 191 км/ч
1.6 AMT
(115 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 5 / 8,5 12,7 с 192 км/ч
1.6 AMT
(115 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 5 / 8,5 12,7 с 192 км/ч
1.6 AMT
(115 л.с.)
essentia АИ-95 Передний 5 / 8,5 12,7 с 192 км/ч
1.8 MT
(140 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 5,8 / 9,9 10,2 с 208 км/ч
1.8 MT
(140 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 5,8 / 9,9 10,2 с 208 км/ч
1.8 AT
(140 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 6,2 / 10,5 11,4 с 188 км/ч
1.8 AT
(140 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 6,2 / 10,5 11,4 с 188 км/ч

универсал

Городской авто

  • ширина
    1 753мм
  • длина
    4 515мм
  • высота
    1 500мм
  • клиренс
    174мм
  • мест
    5
Двигатель Название Топливо Привод Расход До сотни Макс. скорость
1.6 MT
(115 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 5,1 / 8,6 11,7 с 191 км/ч
1.6 MT
(115 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 5,1 / 8,6 11,7 с 191 км/ч
1.6 MT
(115 л.с.)
essentia АИ-95 Передний 5,1 / 8,6 11,7 с 191 км/ч
1.6 AMT
(115 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 5,3 / 8,8 12,7 с 192 км/ч
1.6 AMT
(115 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 5,3 / 8,8 12,7 с 192 км/ч
1.8 MT
(140 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 5,9 / 10 10,5 с 207 км/ч
1.8 MT
(140 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 5,9 / 10 10,5 с 207 км/ч
1.8 AT
(140 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 6,2 / 10,5 11,7 с 188 км/ч
1.8 AT
(140 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 6,2 / 10,5 11,7 с 188 км/ч

купе-кабриолет

Городской авто

  • ширина
    1 759мм
  • длина
    4 476мм
  • высота
    1 411мм
  • клиренс
    ???
  • мест
    4
Двигатель Название Топливо Привод Расход До сотни Макс. скорость
1.8 MT
(140 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 6,2 / 10,3 11,4 с 209 км/ч
1.8 MT
(140 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 6,2 / 10,3 11,4 с 209 км/ч
1.8 AT
(140 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 6,5 / 10,8 12,7 с 189 км/ч
1.8 AT
(140 л.с.)
enjoy АИ-95 Передний 6,5 / 10,8 12,7 с 189 км/ч
2.0T MT
(200 л.с.)
cosmo АИ-95 Передний 7,3 / 13,3 8,9 с 237 км/ч

Ищите отзывы о Opel Astra?

Посмотреть отзывы о Opel Astra

Сделано тест-драйвов:
2 8 7 3

Выбор модификации ASTRA H (L48) — Сервер-Авто

OPEL ASTRA H (L48) 1.3 CDTI
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.3 CDTI
08/2005 -
Наклонная задняя часть
08/2005 - Z 13 DTH 1.2 л. 1.2 л.
90 л.с.
Дизель
Z 13 DTH
90 л.с. Дизель
OPEL ASTRA H (L48) 1.4
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.4
03/2004 -
Наклонная задняя часть
03/2004 - Z 14 XEP 1.4 л. 1.4 л.
90 л.с.
бензин
Z 14 XEP
90 л.с. бензин
OPEL ASTRA H (L48) 1.4
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.4
04/2004 - 10/2004
Наклонная задняя часть
04/2004 - 10/2004 Z 14 XEL 1.4 л.
1.4 л.
75 л.с.
бензин
Z 14 XEL
75 л.с. бензин
OPEL ASTRA H (L48) 1.4 LPG
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.4 LPG
08/2009 -
Наклонная задняя часть
08/2009 - Z 14 XEP 1.4 л. 1.4 л.
90 л.с.
Бензин/автогаз (LPG)
Z 14 XEP
90 л.с. Бензин/автогаз (LPG)
OPEL ASTRA H (L48) 1.6
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.6
03/2004 -
Наклонная задняя часть
03/2004 - Z 16 XEP 1.6 л. 1.6 л.
105 л.с.
бензин
Z 16 XEP
105 л.с. бензин
OPEL ASTRA H (L48) 1.6
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.6
03/2004 -
Наклонная задняя часть
03/2004 - Z 16 XE1 1.6 л. 1.6 л.
105 л.с.
бензин
Z 16 XE1
105 л.с. бензин
OPEL ASTRA H (L48) 1.6
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.6
12/2006 -
Наклонная задняя часть
12/2006 - Z 16 XER 1.6 л. 1.6 л.
116 л.с.
бензин
Z 16 XER
116 л.с. бензин
OPEL ASTRA H (L48) 1.6
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.6
12/2006 -
Наклонная задняя часть
12/2006 - A 16 XER 1.6 л. 1.6 л.
116 л.с.
бензин
A 16 XER
116 л.с. бензин
OPEL ASTRA H (L48) 1.6 Turbo
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.6 Turbo
02/2007 -
Наклонная задняя часть
02/2007 - Z 16 LET 1.6 л. 1.6 л.
180 л.с.
бензин
Z 16 LET
180 л.с. бензин
OPEL ASTRA H (L48) 1.7 CDTI
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.7 CDTI
02/2007 -
Наклонная задняя часть
02/2007 - A 17 DTJ 1.7 л. 1.7 л.
110 л.с.
Дизель
A 17 DTJ
110 л.с. Дизель
OPEL ASTRA H (L48) 1.7 CDTI
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.7 CDTI
02/2007 -
Наклонная задняя часть
02/2007 - Z 17 DTJ 1.7 л. 1.7 л.
110 л.с.
Дизель
Z 17 DTJ
110 л.с. Дизель
OPEL ASTRA H (L48) 1.7 CDTI
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.7 CDTI
02/2007 -
Наклонная задняя часть
02/2007 - Z 17 DTR 1.7 л. 1.7 л.
125 л.с.
Дизель
Z 17 DTR
125 л.с. Дизель
OPEL ASTRA H (L48) 1.7 CDTI
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.7 CDTI
02/2007 -
Наклонная задняя часть
02/2007 - A 17 DTR 1.7 л. 1.7 л.
125 л.с.
Дизель
A 17 DTR
125 л.с. Дизель
OPEL ASTRA H (L48) 1.7 CDTI
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.7 CDTI
03/2004 -
Наклонная задняя часть
03/2004 - Z 17 DTL 1.7 л. 1.7 л.
80 л.с.
Дизель
Z 17 DTL
80 л.с. Дизель
OPEL ASTRA H (L48) 1.7 CDTI
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.7 CDTI
03/2004 -
Наклонная задняя часть
03/2004 - Z 17 DTH 1.7 л. 1.7 л.
100 л.с.
Дизель
Z 17 DTH
100 л.с. Дизель
OPEL ASTRA H (L48) 1.8
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.8
01/2006 -
Наклонная задняя часть
01/2006 - Z 18 XER 1.8 л. 1.8 л.
140 л.с.
бензин
Z 18 XER
140 л.с. бензин
OPEL ASTRA H (L48) 1.8
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.8
01/2006 -
Наклонная задняя часть
01/2006 - A 18 XER 1.8 л. 1.8 л.
140 л.с.
бензин
A 18 XER
140 л.с. бензин
OPEL ASTRA H (L48) 1.8
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.8
03/2004 -
Наклонная задняя часть
03/2004 - Z 18 XE 1.8 л. 1.8 л.
125 л.с.
бензин
Z 18 XE
125 л.с. бензин
OPEL ASTRA H (L48) 1.9 CDTI
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.9 CDTI
06/2004 -
Наклонная задняя часть
06/2004 - Z 19 DT 1.9 л. 1.9 л.
120 л.с.
Дизель
Z 19 DT
120 л.с. Дизель
OPEL ASTRA H (L48) 1.9 CDTI
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.9 CDTI
09/2004 -
Наклонная задняя часть
09/2004 - Z 19 DTH 1.9 л. 1.9 л.
150 л.с.
Дизель
Z 19 DTH
150 л.с. Дизель
OPEL ASTRA H (L48) 1.9 CDTI
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.9 CDTI
09/2005 -
Наклонная задняя часть
09/2005 - Z 19 DTL 1.9 л. 1.9 л.
100 л.с.
Дизель
Z 19 DTL
100 л.с. Дизель
OPEL ASTRA H (L48) 1.9 CDTI 16V
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 1.9 CDTI 16V
04/2004 -
Наклонная задняя часть
04/2004 - Z 19 DTJ 1.9 л. 1.9 л.
120 л.с.
Дизель
Z 19 DTJ
120 л.с. Дизель
OPEL ASTRA H (L48) 2.0 Turbo
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 2.0 Turbo
03/2004 -
Наклонная задняя часть
03/2004 - Z 20 LEL 2 л. 2 л.
170 л.с.
бензин
Z 20 LEL
170 л.с. бензин
OPEL ASTRA H (L48) 2.0 Turbo
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 2.0 Turbo
03/2005 -
Наклонная задняя часть
03/2005 - Z 20 LEH 2 л. 2 л.
240 л.с.
бензин
Z 20 LEH
240 л.с. бензин
OPEL ASTRA H (L48) 2.0 Turbo
Наклонная задняя часть
OPEL ASTRA H (L48) 2.0 Turbo
09/2004 -
Наклонная задняя часть
09/2004 - Z 20 LER 2 л. 2 л.
200 л.с.
бензин
Z 20 LER
200 л.с. бензин

Активация бортового компьютера для Astra-H

Функционал необходимый для работы бортового компьютера в Opel Astra предусмотрен с завода, для его активации необходимо перепрограммировать блок DIS.
Для начала необходимо узнать кодовый индекс установленного у вас дисплея. Кодовый индекс, это специальное число определяющее алгоритм работы модуля DIS. Это табличное значение индивидуальное и присвоенное для различных блоков.

Для того что бы узнать кодовый индекс, подключаемся к DIS при помощи OP-COM, после чего находим необходимый индекс в коне коммуникаций. Далее производим следующие действия:
1. Входим в DIS модуль.. Astra-h — > Infotainment —> DIS;
2. Определяем кодовый индекс в последней строке окна коммуникаций;
3. Нажимаем кнопку Programming и входим в окно режимов программирования;
4. Жмем кнопочку Program Code Index и выходим в окно программирования КИ;
5. Выбираем в левом верхнем окне КИ на единицу больше чем текущий;
6. Нажимаем кнопку Start Programming и ожидаем окончания процесса программирования.

После того, как бортовой компьютер активирован у многих появляется проблема с показаниями датчика топлива. На приборной панели показывает, как надо, а на дисплее не совсем адекватно. Чтобы устранить эту проблему — самое простое скинуть минусовую клемму. После сброса питания датчик уровня топлива сам заново калибруется и показания приходят в норму.

Приобрести OP-COM в нашем магазине.

Подбор оборудования:

Марка автомобиляAcuraAlfa RomeoAudiBentleyBMWBuickBYDCadillacCheryChevroletChryslerCitroenDaewooDaihatsuDodgeFAWFerrariFiatFordGeelyGMGreat WallHondaHummerHyundaiInfinitiIsuzuJaguarJeepKiaLanciaLand RoverLexusLifanLincolnLotusMaseratiMazdaMercedes-BenzMiniMercuryMitsubishiNissanOldsmobileOpelPeugeotPlymouthPontiacPorscheRenaultRoverSAABSaturnScion SeatSkodaSmartSsangYongSubaruSuzukiToyotaVolkswagenVolvoГАЗИжТагАЗУАЗЛада (ВАЗ)

Выберите вид оборудованияНе важноАвтосканеры для личного использованияПрофессиональные автосканерыПрограмматорыОборудование для чип-тюнингаКорректировкa одометровПереходники для автосканеровШлейфы для приборных панелейДилерское диагностическое оборудованиеБортовые компьютерыСпецинструментГаражное оборудование

Модель автомобиляГод19801981198219831984198519861987198819891990199119921993199419951996199719981999200020012002200320042005200620072008200920102011201220132014201520162017201820182019201920202020202120212022

Размеры шин и дисков для Opel astra+h

Марка автомобиля: Бренд Acura Alfa Romeo Aston Martin Audi Bentley BMW Brilliance Buick Byd Cadillac Changan Chery Cheryexeed Chevrolet Chrysler Citroen Daewoo Daihatsu Datsun Dodge Dongfeng Ds Dw FAW Ferrari Fiat Ford Foton Gac Geely Genesis Great Wall Hafei Haima Haval Hawtai Honda Hummer Hyundai Infiniti Iran khodro Isuzu Iveco Jac Jaguar Jeep Kia Lamborghini Lancia Land Rover Lexus Lifan Lincoln Lotus Maserati Maybach Mazda Mercedes MG Mini Mitsubishi Nissan Opel Peugeot Pontiac Porsche Ravon Renault Rolls Royce Rolls-royce Rover Saab Seat Skoda Smart SsangYong Subaru Suzuki Tesla Toyota Volkswagen Volvo Vortex (tagaz) ZAZ Zotye АЗЛК ВАЗ ГАЗ ОКА ТаГАЗ УАЗ

Модель: Модель Adam Agila Ampera Antara Astra Family H Astra G Astra H Astra J Cascada Combo Combo Tour Corsa Corsa C Corsa D Corsa Van Crossland Frontera Grandland X GT Roadster Insignia Meriva Mokka Monterey Movano Omega Signum Speedster Tigra Vectra Vectra B Vectra C Vivaro Zafira Zafira Life

BOSCH Aerotwin A 931 S opel astra H

Щетки Опель Астра Н: основные преимущества

Комплект щеток стеклоочистителей AeroTwin A 931 S – это бескаркасные щетки высокого качества. Устанавливается на переднее стекло Opel Astra, которая производилась с 2004 по 2012 год. Имеет крепление типа Side Pin и оснащен аэродинамическим спойлером. Дворники Opel Astra H от Бош рекомендуются как отличная замена оригинальных передних дворников.

  • Идеальное прилегание к стеклу по всей длине щетки;
  • Современная бескаркасная конструкция;
  • Быстрая очистка;
  • Минимальный шум ветра;
  • Равномерный износ благодаря одинаковой силе прижима;
  • Устойчивость к насекомым и разным загрязнениям;
  • Идеальная работа зимой – лед не примерзает к щетке;
  • Спойлер для увеличения прижимной силы на высоких скоростях;
  • Защита от вибрации и скрипа.

Дворники Opel Astra H 2004-2012 выполнены из качественных материалов, отлично очищают лобовое стекло при любой скорости и имеет долгий срок службы.

Щетки Bosch Aerotwin: рекомендации по замене


Покупайте только оригинальные фирменные дворники. Они не требуют частой замены и лучше справляются с влагой.

При замене дворников накрывайте лобовое стекло плотным покрывалом. Это убережет его от случайного падения щетки под действием пружины.

Езда с неисправными дворниками небезопасна и запрещена законом. Не откладывайте замену щеток на «потом».

Согласно ГОСТу, исправные щетки должны полностью очищать стекло за 5 равномерных «взмахов». Если для этого нужно больше времени – дворники необходимо менять.

У нас в продаже только качественные фирменные щетки стеклоочистителей по доступным ценам. Чтобы купить щетки стеклоочистителя Bosch Aerotwin, оформите заказ прямо на этой странице! Постоянным клиентам мы предоставляем скидку!

Также, у нас большой ассортимент щеток разных производителей! Заходите на другие страницы сайта, чтобы убедиться в этом!


Моторное масло для Opel Astra H и J, какое масло лить в двигатель (1.6, 1.8) Опель Астра, сколько масла заливать при замене

Первое поколение Opel Astra сошло с конвейера в 1991 году. Последним автомобилем в модельном ряду является Opel Astra K, который выпускается с 2015 года. В техническом плане наиболее похожими являются Opel Astra H (выпускалась с 2004 по 2014 год) и Opel Astra J (выпускалась с 2009 по 2015 год). Эти два поколения оснащались похожими моторами семейства Ecotec (бензиновые моторы) и ecoFLEX (дизельные моторы) объемом 1.3, 1.4, 1.6, 1.8 и 2.0 литра (атмосферные и турбированные). Трансмиссия Opel Astra H была представлена 5- и 6-ступенчатой механикой, 4- или 6-ступенчатым автоматом или 5-ступенчатым роботом. Покупателям Opel Astra J был доступен более скромный выбор – 5- или 6-ступенчатая механика или 6-ступенчатый «классический» автомат.

У компании General Motors, которая в то время владела брендом Opel, имеется собственная система допусков моторных масел, и их необходимо учитывать при обслуживании моделей Опель Астра H и Опель Астра J. Для бензиновых и дизельных моторов, которые были выпущены с 2002 по 2010 год, применяются допуски GM-LL-A-025 и GM-LL-B-025 соответственно. Еще позднее им на смену пришли новые допуски – DEXOS-1 и DEXOS-2. Они отвечали более жестким экологическим нормам. Для других автомобилей Опель Астра, выпущенных до 2002 года, нужно подбирать моторное масло, которое соответствует международным спецификациям – ACEA A3 (для бензиновых моторов) и ACEA A3 ACEA В3/В4 (для дизельных моторов).

Моторные масла для Opel Astra от компании TotalEnergies

В ассортименте компании TotalEnergies имеется несколько видов моторных масел, которые подойдут для разных поколений Опель Астра:

  • Для Opel Astra H и Opel Astra J с двигателями объемом 1.6, 1.8 и другие рекомендуется использовать моторное масло QUARTZ INEO MC3 с вязкостью 5W-30 и 5W-40. Оно соответствует спецификации GM Dexos 2. Это синтетическое малозольное масло подходит для теплонагруженных двигателей и имеет специальный состав, который делает его стабильным при высоких температурах, препятствует образованию осадка и защищает двигатель.
  • Для Опель Астра G подойдет моторное масло QUARTZ 9000 с вязкостью 5W-40, которое соответствует международному стандарту ACEA В3/В4. Оно разработано по синтетической технологии и содержит компоненты, которые обеспечивают длительную защиту двигателя от износа, даже при тяжелых условиях эксплуатации.

Для других моделей Опель Астра подобрать моторное масло можно через специальную форму. Там же можно найти и другие технические жидкости от компании TotalEnergies, которые понадобятся для обслуживания автомобиля.

Замена масла в двигателе Опель Астра

Правильная замена масла в двигателе Опель Астра Н и других моделей не менее важна, чем выбор смазывающей жидкости. При этом важно соблюдать интервалы замены и учитывать заправочный объем. Производитель рекомендует проводить обслуживание каждые 30-50 тысяч км или один раз в год. На практике эти интервалы лучше сократить до 10-15 тысяч км, особенно если автомобиль эксплуатируется в тяжелых условиях.

Сколько масла заливать в двигатель Опель Астра? Это зависит от объема агрегата. Например, у бензинового мотора объемом 1.6 заправочный объем составляет 4.3 литра. Узнать объем масла в двигателе конкретной модели Опель Астра можно из руководства по эксплуатации.

шрифтов — Aster SH Geometric by Scangraphic++

Доступные варианты покупки: Рабочий стол, веб-шрифт, расширенный

Об этом шрифте

С момента выпуска этих шрифтов большинство гарнитур Scangraphic Type Collection появилось в двух версиях.Один разработан специально для набора заголовков (SH: Scangraphic Headline Types), а другой специально для набора текста (SB Scangraphic Bodytypes). Наиболее очевидное различие можно найти в интервале. Типы кузовов скорректированы для удобочитаемости. Типы заголовков явно более узкие, чтобы соответствовать требованиям набора заголовков. Таблицы кернинга также были индивидуализированы для каждой из этих разновидностей шрифта. Помимо регулировки интервала, есть и корректировки в дизайне.Для типов тела были созданы тонкие пространства, которые предотвращали эффект смазывания на острых углах в небольших размерах. Для ряда типов тела линии волос и засечки были утолщены или весь шрифт был скорректирован, чтобы соответствовать оптическим требованиям для набора шрифта в небольших размерах. Для немецких диакритических знаков строчными буквами все дополнения типов заголовков содержат альтернативные встроенные акценты, которые позволяют компактно устанавливать заголовки строчными буквами.

Поддерживаемые языки

африкаанс, албанский, асу, баскский, бемба, бена, чига, конго-суахили, корнский, датский, голландский, английский, эстонский, филиппинский, финский, французский, галисийский, немецкий, гуси, индонезийский, ирландский, итальянский, кабувердиану, календжин, Киньяруанда, луо, луйя, мачаме, махува-митто, маконде, малагасийский, малайский, мэнский, морисьен, северный ндебеле, норвежский букмол, норвежский нюнорск, ньянколе, оромо, португальский, ретороманский, ромбо, рунди, руа, самбуру, санго, сангу , Sena, Shambala, Shona, Soga, сомалийский, испанский, суахили, шведский, швейцарский немецкий, Taita, Teso, Vunjo, Zulu

Доступные форматы

Opentype (OTF)
@Font-Face Webfont

Совместимость

Совместимость с Mac и ПК

Пуховая астра | Рорер Семена

Rohrer Seeds стремится к вашему успеху! Каждое семя, которое вы покупаете у нас, должно удовлетворить вас… или вернуть ваши деньги.Мы усердно работаем с 1919 года, чтобы обеспечить семена самого высокого качества по доступным ценам. Любые семена, приобретенные у нас, должны быть того качества, которое мы вам представляем. Если нет, вы можете вернуть его за наш счет. Ваши деньги будут возвращены или выданы в качестве кредита на другую покупку. Подробнее см. ниже. Все цены могут быть изменены без предварительного уведомления.

*Негарантийный. Прилагаются все усилия, чтобы предоставить всем покупателям семена хорошего качества, которые окажутся прибыльными и удовлетворительными, однако следующий пункт должен быть разъяснен.Мы не даем никаких явных или подразумеваемых гарантий продуктивности любых семян, которые мы продаем, и никоим образом не несем ответственности за урожай. Наша ответственность во всех случаях ограничивается только покупной ценой семян.

Пожалуйста, проверьте свой заказ сразу по прибытии и незамедлительно сообщите о любых проблемах. Мы оставляем за собой право запросить возврат любого продукта, признанного неудовлетворительным, до утверждения какой-либо корректировки.

Любые растительные материалы, купленные весной, которые не растут, будут заменены или выдан кредитный ваучер, один раз, при условии, что за ними правильно ухаживали, и мы были уведомлены до 1 октября того года, когда они были приобретены.

Луковицы или растения, отправленные летом или осенью, которые не растут, будут заменены или выдан кредитный ваучер, один раз, при условии, что они были посажены правильно, и потеря не связана с плохой зимней защитой или грызунами, и мы уведомлены до 1 июня. следующего года.

Мы также гарантируем вам полное удовлетворение нашими садовыми принадлежностями и аксессуарами (не для выращивания) при использовании в соответствии с инструкциями производителя. Пожалуйста, сообщите о любом неудовлетворительном аксессуаре в течение 30 дней для замены, кредита или возмещения покупной цены.В некоторых случаях гарантия производителя может действовать по истечении 30-дневного срока. Наша ответственность ограничивается покупной ценой заменяемого товара.

Note-Seeds — это живые продукты, которые зависят от многих факторов, таких как правильное время и техника посадки, глубина посева, почва, надлежащая среда для прорастания, плодородие, борьба с болезнями, борьба с насекомыми и подходящая погода для прямого посева семян. Если какой-либо из этих факторов неправильный, это может привести к тому, что семена не будут работать, и поскольку большинство, если не все, эти факторы находятся вне нашего контроля, большая часть успеха этих семян находится в руках производителя.Если за ними правильно ухаживали, но они все еще не растут, мы заменим семена или выдадим кредитный ваучер, один раз. Мы гарантируем, что продаваемые нами семена соответствуют этикетке, однако наша ответственность ограничивается покупной ценой семян.

Типографские ошибки. Хотя для обеспечения точности принимаются все меры предосторожности, могут возникать ошибки в цене, количестве и/или спецификациях. Мы оставляем за собой право исправлять такие ошибки. Товарам со скидкой будет выдан только кредитный ваучер на покупную цену.

Обновление образа Linux — несущая плата Aster

 

Внимание: Краткое руководство для BSP 2.8, основанное на дистрибутиве Ангстрема, больше не обновляется. В зависимости от вашей SoM у вас есть разные варианты:

Vybrid и Tegra : информация предоставляется как есть и остается точной, поскольку более новые BSP Toradex не переносятся на эти SoM. Просто имейте в виду, что Руководства больше не поддерживаются, даже если мы обнаружим ошибки или устаревшие инструкции.

Apalis TK1 (все варианты), Colibri iMX6ULL (все варианты), Colibri iMX7S 256 МБ и Colibri iMX7D 512 МБ : эти компьютеры на модулях по-прежнему регулярно обслуживаются в наших BSP, и для начала вы должны проверить страницу программного обеспечения Toradex. Слои BSP и эталонные изображения для проекта Yocto. Поскольку Torizon не поддерживается, краткое руководство на данный момент недоступно.

Все остальные SoM на базе i.MX : у вас есть два варианта начать работу со встроенным Linux: первый — следовать краткому руководству для Torizon, которое обеспечивает наилучшие готовые возможности, или вы решите использовать Yocto, проверьте страницу программного обеспечения Toradex BSP Layers and Reference Images for Yocto Project.

В этом разделе с практическими рекомендациями вы обновитесь до последней предварительно собранной версии Linux, предоставленной Toradex.

В этом модуле вы:

  • Отформатируйте SD-карту.
  • Используйте SD-карту для прошивки нового образа в модуль.
  • Доступ к загрузчику (U-Boot).
  • Прошить новый образ Linux в модуль.

В следующей таблице перечислены необходимые элементы:

Список необходимых предметов
SD-карта объемом более 2 ГБ
Кабель USB-микро-USB

Примечание: Следующие шаги предназначены для выполнения на рабочей станции разработки, а не на целевом модуле, если не указано иное.

Установите необходимые компоненты для создания SD-карты:

  

sudo dpkg --ad-архитектура I386

sudo apt-get Обновление

sudo apt-get install dosfstools e2fsprogs gawk mtools parted

sudo apt-get install zlib1g: i386 liblzo2-2: i386 libuuiid1: i386 libusb- 1.0-0:i386

sudo apt-get install gparted

Прежде чем вставлять SD-карту в главный компьютер, перечислите жесткие диски и разделы, используемые вашей системой.См. пример ниже:

  

[email protected]:~$ df -h

Используемый размер файловой системы Доступно Использование% Установлен на

udev 3,9G 0 3,9G 0% /dev

tmpfs 792M 50M 743M 7% /run

udev 3,9G 0 3,9G 0% /sda7 42G 30G 10G 75% /

tmpfs 3,9G 145M 3,8G 4% /dev/shm

tmpfs 5,0M 8,0K 5,0M 1% /run/lock

tmpfs 3,9G 0 3 ,9G 0% /sys/fs/cgroup

/dev/sda5 922M 340M 520M 40% /boot

/dev/sda8 178G 28G 141G 17% /usr/local

/dev/sdb5 620G3 558G5% home

tmpfs 792M 92K 792M 1% /run/user/1000

Обратите внимание на два жестких диска: /dev/sda и /dev/sdb .Индексы перечисляют различные разделы внутри дисков и могут быть проигнорированы.

Вставьте SD-карту в хост-компьютер. Должно появиться всплывающее сообщение. Выберите опцию Ничего не делать , как показано на рисунке ниже:

Обратите внимание, что некоторые SD-карты имеют физическую блокировку, которая включает режим только для чтения, поэтому вы должны убедиться, что эта блокировка не включена. Если блокировка включена, дальнейшие шаги из этого раздела инструкций не будут работать.

Список жестких дисков и разделов, используемых вашей системой.См. пример ниже:

  

[email protected]:~$ df -h

Используемый размер файловой системы Доступно Использование % Установлен на

udev 3,9G 0 3,9G 0% /dev

tmpfs 792M 50M 743M 7% /run

5 /sda7 42G 30G 10G 75% /

tmpfs 3,9G 145M 3,8G 4% /dev/shm

tmpfs 5,0M 8,0K 5,0M 1% /run/lock

tmpfs 3,9G 0 3 ,9G 0% /sys/fs/cgroup

/dev/sda5 922M 340M 520M 40% /boot

/dev/sda8 178G 28G 141G 17% /usr/local

/dev/sdb5 620G3 558G5% home

tmpfs 792M 92K 792M 1% /run/user/1000

/dev/mmcblk0p1 7,5G 296M 7,2G 4% /media/<пользователь>/3E18-AADE

Обратите внимание, что появилось новое устройство /dev/mmcblk0 , и это SD-карта.

Если вы используете SD-карту для USB-адаптера, ваше устройство может быть указано как /dev/sdX , где символ X зависит от количества дисков в вашей системе. Для компьютера из примера устройство /dev/sdc :

  

/dev/sdc1 7,5G 296M 7,2G 4% /media/<пользователь>/3E18-AADE

Внимание: Внимательно выполните следующие шаги. Если вы используете неправильное устройство, вы сотрете жесткий диск компьютера и безвозвратно потеряете данные.

Запустите gparted из командной строки, используя устройство SD-карты в качестве аргумента:

  

sudo gparted /dev/mmcblk0

Откроется окно, показанное на рисунке ниже. В правом верхнем углу окна должно быть указано только устройство SD-карты:

.
  • Разделенный графический интерфейс

Предупреждение: Если вы не передадите SD-карту в качестве аргумента для gparted, все ваши диски будут перечислены и, следовательно, вы более склонны к форматированию жесткого диска вашей машины.

В меню Partition выберите параметр Unmount :


  • Отключить SD-карту

Удалите все разделы с SD-карты, используя опцию Удалить из меню Раздел :

В меню Раздел выберите параметр Новый . Появится новое окно:


  • Создать новый раздел

В раскрывающемся меню Файловая система выберите параметр fat32 :


  • Выберите файловую систему FAT32

Также создайте метку для своего раздела, например данные .Это не обязательно, но когда система автоматически монтирует SD-карту, она будет использовать эту метку в качестве имени каталога, в который будет монтироваться устройство.

Запустите процесс, нажав зеленую кнопку с галочкой Применить все операции и подтвердите предупреждающее сообщение:


  • Применить все операции

Во время процесса в окне будет отображаться информация. Просто подождите, пока он не закончится:


  • Форматирование SD-карты

В конце концов, у вас должно получиться окно Gparted, подобное приведенному ниже.Затем вы можете закрыть Gparted.

Установите SD-карту. Два простых способа сделать это: — Либо щелкнуть значок SD-карты в лаунчере слева от экрана, либо — Откройте диспетчер файлов и щелкните метку раздела SD-карты, указанную в левой части окна.

Оба варианта показаны на рисунке ниже:


  • Установка SD-карты

Обратите внимание, что путь монтирования по умолчанию для Ubuntu:

  

/media/<пользователь>/<метка_раздела>

Где пользователь — это пользователь, под которым вы вошли, а partition_label — метка, выбранная на шаге 10, или случайное буквенно-цифровое значение, если метка была оставлена ​​пустой.

Загрузите готовый образ Linux. Найдите здесь последний готовый образ Toradex для вашего модуля.

Извлечь содержимое сжатого файла с привилегиями root:

Примечание: Вы должны выполнять от имени пользователя root, чтобы сохранить разрешения целевой корневой файловой системы.

  

sudo tar xjvf Colibri-<ссылка на SoC>_LXDE-Image_-<дата>.tar.bz2

Чтобы прошить SD-карту, войдите в каталог образа Linux и запустите обновление .скрипт ш :

  

cd Colibri-<ссылка на SoC>_LXDE-Image_

./update.sh -o /media///

Размонтируйте SD-карту и извлеките ее из рабочей станции:

  

umount /media///

Вставьте SD-карту в разъем SD/MMC, как показано на рисунке:


  • Гнездо для карты SD выделено

Убедитесь, что на хост-компьютере установлено работающее приложение последовательного терминала. Примечание: Вы можете вернуться к последнему разделу, если есть какие-либо сомнения относительно приложения последовательного терминала и его конфигурации.

Подключите кабель кабеля USB A к micro B к клиентскому разъему USB (x10), чтобы войти в режим восстановления.


  • Кабель USB A-micro B

Одновременно подайте питание на встроенную систему и несколько раз нажмите клавишу ПРОБЕЛ на клавиатуре, сосредоточив внимание на последовательном терминале.В случае успеха эта процедура остановит загрузчик, и вы увидите терминал со следующей подсказкой:

.
  

Загрузчик Toradex 2.1b2 для Tegra Built 8 Aug 2017 14:58:18

Нажмите [ПРОБЕЛ] для входа в меню загрузчика

Конфигурация загрузчика:

C) Очистить реестр

) Загрузить образ в RAM сейчас

F) Загрузить образ во FLASH сейчас

L) Запустить существующий резидентный образ flash сейчас

Введите свой выбор:

Примечание: Если вы нажмете клавишу ПРОБЕЛ слишком поздно, система начнет загружаться.Выключите питание и повторите попытку.

Нажмите X, чтобы войти в режим командной строки, затем введите следующую команду, чтобы войти в режим восстановления:

  

Введите свой выбор: x

>reboot rcm

Перезагрузка...

На хост-компьютере используйте следующую команду для загрузки загрузчика U-Boot в ОЗУ модуля:

  

[ Colibri-T30_LXDE-Image_2.7.4 ] $ ./update.sh -d

Colibri T30 rootfs обнаружен

На терминале вашего целевого устройства вы увидите, что U-boot автоматически запускается:

  

U-Boot SPL 2016.11-2.7.4+g1b121c6 (05 октября 2017 г. - 04:24:38)

Попытка загрузки из оперативной памяти

U-Boot 2016.11-2.7.4+g1b121c6 (05 октября 2017 г. - 04:24:38 +0000)

TEGRA30

DRAM: 1 ГиБ

MMC: Tegra SD/MMC: 0, Tegra SD/MMC: 1

*** Предупреждение — неверный CRC, используется среда по умолчанию

Err: vidconsole

ОТСУТСТВУЕТ БЛОК КОНФИГУРАЦИИ TORADEX

Модель: Toradex Colibri T30 1 ГБ

Режим восстановления USB, автозагрузка отключена

Сеть: Ethernet не найден.

Выполните следующие команды на терминале вашего целевого устройства , чтобы прошить образ:

  

Colibri T30 # запустить setuppdate

чтение flash_blk.img

710 байты прочитанные в 13 мс (52,7 kib / s)

## исполнительный скрипт на 81000000

чтение colibri_t30 / flash_blk.img

5083 байты читаются в 23 мс (215,8 КиБ/с)

## Выполнение скрипта по адресу 81000000

введите «запустить обновление», чтобы обновить весь модуль

Colibri T30 # запустить обновление

Через некоторое время система загрузит обновленный образ Linux, и вы увидите сообщение для входа:


Конфигурация драйверов Aster nCluster JDBC

Драйверы JDBC — Драйверы JDBC Aster nCluster

JDBC Teradata Aster (v3.0) драйвер (поставляется с Teradata Aster) должен быть загружен у поставщика и больше не входит в состав Aqua Data Studio. Скопируйте драйвер в папку Aqua Data Studio/lib/drivers.

Поставщик: Aster Data Systems
Веб-сайт: http://www.asterdata.com
База данных Продукт: Aster nCluster
Описание: Высокопроизводительная аналитическая база данных для хранения данных — интеграция SQL с MapReduce.

C:\Program Files\Aqua Data Studio 12.0 - 64bit\lib\drivers>каталог
 Том на диске C не имеет метки.
 Серийный номер тома: 40F4-2392.

 Каталог C:\Program Files\Aqua Data Studio 12.0 - 64bit\lib\drivers

26.07.2012 07:45  .
26.07.2012 07:45  ..
26.07.2012 06:33 1 146 367 db2java.jar
26.07.2012 06:33 3 348 681 db2jcc.jar
26.07.2012 06:33 1015 db2jcc_license_cu.jar
26.07.2012 06:33 2 671 577 дерби.банка
26.07.2012 06:33 538,340 derbyclient.jar
26.07.2012 06:33 239 546 derbynet.jar
26.07.2012 06:33 812 386 ifxjdbc.jar
26.07.2012 06:33 1 437 384 jconnect70.jar
26.07.2012 06:33 4,581,825 jt400.jar
26.07.2012 06:33 327 933 jtds-src.jar
26.07.2012 06:33 327 974 jtds.jar
26.07.2012 06:33 291 946 mongo.jar
26.07.2012 06:33 651 205 mysql-src.jar
26.07.2012 06:33 745 416 mysql.банка
26.07.2012 06:33 445 188 ncluster.jar
26.07.2012 06:33 2 714 189 ojdbc6.jar
26.07.2012 06:33 1 656 248 orai18n.jar
26.07.2012 06:33 346 944 paraccel-jdbc.jar
26.07.2012 06:33 561 969 postgresql.jar
26.07.2012 06:33 3 516 830 sqlite-jdbc.jar
26.07.2012 06:33 286 773 util400.jar
26.07.2012 06:33 262 740 xdb6.jar
26.07.2012 06:33 839 982 xmlparserv2.jar
              23 файла(ов) 27 752 458 байт
               2 Dir(s) 252 798 070 784 байта свободно

C:\Program Files\Aqua Data Studio 12.0 - 64-битная\библиотека\драйверы> 

Путь к классу Java для драйверов уже настроен для ADS в datastudio.ini для запуска ADS с помощью datastudio.exe и в datastudio.bat/.sh и datastudio-bundled.bat/.sh для запуска ADS из командной строки. Содержимое файла следующее…

C:\Program Files\Aqua Data Studio 12.0 - 64bit> введите datastudio.ini
рабочий.каталог=.

# Свойства JVM
vm.location=.\jre\bin\сервер\jvm.dll

# Укажите долю доступной физической памяти для использования (т.имеет отношение к -
Xmx аргумент). Например, vm.heapsize.max.percent=75. Обратите внимание, что это будет использовать m
Максимально возможная память.
#vm.heapsize.max.percent=

# Укажите долю доступной физической памяти для использования в качестве минимальной
размер кучи (т. е. относится к -Xms arg).
#vm.heapsize.min.percent=

#Укажите предпочтительное количество (в МБ) для размера кучи (т.е. относится к -Xmx arg).
 Если эта сумма недоступна, она будет использовать максимально возможную сумму с учетом t
Доступна физическая память.
#vm.heapsize.предпочтительный =

#Указывает, что в любой момент времени должен работать только один экземпляр продукта.
#single.instance=окно
single.instance=dde
dde.enabled=истина
dde.class=com.common.windows.noobfus.WinDDE
dde.server.name=студия данных

vmarg.1=-Dsun.swing.enableImprovedDragGesture
vmarg.2=-Xmx756M
vmarg.3=-XX:MaxPermSize=128м

путь к классам.1=.\lib\*.jar
classpath.2=.\lib\antlr\*.jar
classpath.3=.\lib\apache\*.jar
classpath.4=.\lib\apple\*.jar
classpath.5=.\lib\aquafold\*.jar
classpath.6=.\lib\aspose\*.jar
путь к классам.7=.\lib\dnsjava\*.jar
classpath.8=.\lib\drivers\*.jar
classpath.9=.\lib\icepdf\*.jar
classpath.10=.\lib\infragistics\*.jar
classpath.11=.\lib\itext\*.jar
classpath.12=.\lib\java\*.jar
classpath.13=.\lib\jgoodies\*.jar
classpath.14=.\lib\jgraph\*.jar
classpath.15=.\lib\jide\*.jar
classpath.16=.\lib\jinterop\*.jar
classpath.17=.\lib\jna\*.jar
classpath.18=.\lib\jogl\*.jar
classpath.19=.\lib\perforce\*.jar
classpath.20=.\lib\quartz\*.jar
classpath.21=.\lib\snmp4j\*.jar
classpath.22=.\lib\ssh3\*.jar
путь к классам.23=.\lib\stndeditor\*.jar
classpath.24=.\lib\svnkit\*.jar

main.class=com.aquafold.datastudio.DataStudio




C:\Program Files\Aqua Data Studio 12.0 — 64-разрядная версия>



C:\Program Files\Aqua Data Studio 12.0 - 64bit> введите datastudio.bat
ЭХО ВЫКЛ.

УСТАНОВИТЬ ОБЪЯВЛЕНИЕ_ПУТЬ =
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\ads.jar
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\aqua-lib.jar
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\antlr\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\apache\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\apple\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\aquafold\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\aspose\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\dnsjava\*
УСТАНОВИТЕ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\drivers\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\icepdf\*
УСТАНОВИТЕ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\infragistics\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\itext\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\java\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\jgoodies\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\jgraph\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\jide\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\jinterop\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\jna\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\jogl\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\perforce\*
УСТАНОВИТЕ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\quartz\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\snmp4j\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\ssh3\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\stndeditor\*
УСТАНОВИТЬ ADS_PATH=%ADS_PATH%;.\lib\svnkit\*

ЭХО ВКЛЮЧЕНО

java -Xmx756M -XX:MaxPermSize=192m -cp "%ADS_PATH%" com.aquafold.datastudio.DataStudio


C:\Program Files\Aqua Data Studio 12.0 — 64-битная версия> 
Скачать шрифт

Aster SH® | Загрузите шрифт Aster SH® сегодня

Что такое шрифт Aster SH®?

С момента выпуска этих шрифтов большинство гарнитур Scangraphic Type Collection появилось в двух версиях.Один разработан специально для набора заголовков (SH: Scangraphic Headline Types), а другой специально для набора текста (SB Scangraphic Bodytypes). Наиболее очевидное различие можно найти в интервале. Типы кузовов скорректированы для удобочитаемости. Типы заголовков явно более узкие, чтобы соответствовать требованиям набора заголовков. Таблицы кернинга также были индивидуализированы для каждой из этих разновидностей шрифта. Помимо регулировки интервала, есть и корректировки в дизайне.Для типов тела были созданы тонкие пространства, которые предотвращали эффект смазывания на острых углах в небольших размерах. Для ряда типов тела линии волос и засечки были утолщены или весь шрифт был скорректирован, чтобы соответствовать оптическим требованиям для набора шрифта в небольших размерах. Для немецких диакритических знаков строчными буквами все дополнения типов заголовков содержат альтернативные встроенные акценты, которые позволяют компактно устанавливать заголовки строчными буквами.

Семейства шрифтов Aster SH®

Aster SH® включает следующие семейства шрифтов:

  • Aster SH Regular
  • Aster SH Italic
  • Aster SH Medium

Aster SH® Preview

Вот предварительный просмотр того, как будет выглядеть Aster SH®.Чтобы просмотреть дополнительные превью с использованием собственного текста в качестве примера, нажмите здесь.

Акценты категорий Навигация по сообщению

Можно ли бесплатно загрузить Aster SH® на 1000fonts.com?

Нет, каждый шрифт, который мы представляем, является премиальным платным шрифтом. Пожалуйста, не тратьте время на поиски бесплатной загрузки Aster SH®.

Маловероятно, что вы сможете найти его бесплатно, вы рискуете заразиться вирусами на своем компьютере, и даже если вы его найдете, помните, что его использование незаконно, если вы не заплатили за него!

Если вам действительно нужен Aster SH®, нажмите здесь, чтобы посетить страницу загрузки и покупки на MyFonts, чтобы получить его с надлежащей лицензией.Дизайнер и издатель заслуживают оплаты за свою работу. 🙂

Leucosyris blepharophylla (ла-плайя-спрингс шиповидная астра)

Описание

Многолетнее травянистое растение с неглубокими тонкими корневищами; стебли из плотных прикорневых розеток, прямостоячие, 4-35 см высотой, зеленые или багрянистые, голые, на нижней 1/2 неветвистые; прикорневые листья толстые, цельнокрайние, линейно-обратноланцетные, сидячие, 8-30 мм длиной, голые, кроме краев, края реснитчатые с толстыми белыми трихомами; стеблевые листья значительно мельче прикорневых, прижаты к стеблю; цветочные головки на прицветных цветоносах, одиночные на стеблевых ветвях или в плотных соцветиях по 2-5; обертка шириной 5-8 мм; филлярии в 4-6 перекрывающихся рядах, каждая продолговатая, острая на вершине, с черной или коричневой средней жилкой; язычковые цветки 8-12, сине-лавандовые; дисковые цветки многочисленные, желтые, иногда с фиолетовым оттенком; хохолок из длинных щетинок, семянки серебристо-волосистые.Цветы с августа по октябрь.

Похожие виды

Arida riparia не имеет прикорневых розеток листьев и имеет более 15 язычковых цветков в каждой головке. У Arida carnosa отсутствуют лучевые цветки, а также прикорневые розетки листьев.

Распределение

Нью-Мексико, округ Идальго; Техас, округ Пресидио; Мексика, чихуахуа.

Среда обитания

Прибрежный — щелочные почвы вокруг источников и просачиваний в зарослях пустыни Чиуауа; 1200–1400 м (3900–4600 футов).

Вопросы сохранения

Щелочные источники в южной части Нью-Мексико и северной части Чиуауа должны быть исследованы в попытке найти дополнительные существующие популяции. Источники в долине Плайяс слишком изменены, чтобы способствовать реинтродукции этого вида.

Важная литература

*Несом Г.Л., Воробик Л.А., Хартман Р.Л. 1990. Идентификация Aster blepharophyllus (Asteraceae: Astereae).Систематическая ботаника 15 (4): 638-642.

Морган, Д.Р. и Р. Л. Хартман. 2003. Краткий обзор Machaeranthera (Asteraceae: Astereae) с признанием отдельных родов. Сида 20 (4): 1387-1416.

Пул, Дж. М., В. Р. Карр, Д. М. Прайс и Дж. Р. Сингхерст. 2007. Редкие растения Техаса: полевой справочник. В.Л. Муди-младший. Серия «Естественная история», номер 37. Издательство Техасского университета A&M, Колледж-Стейшн. 656 стр.

Пруски. Дж. Ф. и Р. Л. Хартман. 2012. Краткий обзор Leucosyris, включая синоним Arida (Compositae: Astereae).\ Фитонейрон 2012-98: 1–15. Опубликовано 12 ноября 2012 г.

границ | Открытие большого количества астроподобных наночастиц в пелагических средах: характеристика и динамика

Введение

Недавние достижения в области наук об окружающей среде и науке о наночастицах помогли выявить неожиданное разнообразие живых и неживых фемтообъектов (0,02–0,2 мкм, как определено для фемтопланктона Sieburth et al., 1978) в окружающей среде. Ранее считалось, что они в основном состоят из вирусов (Sieburth et al., 1978), последовательное открытие в значительном количестве и в различных средах загадочных наночастиц (Folk, 1993; McKay et al., 1996; Sillitoe et al., 1996; ) (Soler et al., 2015; Biller et al., 2017), ультрамикропрокариоты (Duda et al., 2012; Brown et al., 2015; Hug et al., 2016; Ortiz-Alvarez, Casamayor, 2016; Wurch et al., 2016; Castelle et al., 2018; Ghuneim et al., 2018) и биомиметические минерало-органические частицы (BMOP) (Wu et al., 2016), значительно усложнил экологическую фракцию фемто-сущностей.

В отличие от вирусов или EV, спорные нанобы, некоторые из которых могут быть связаны с BMOP, и ультрамикропрокариоты, включая недавно обнаруженные CPR ( Candidate Phyla Radiation ) и DPANN ( Diapherotrites, Parvarchaeota, Aenigmarchaeota, Nanoarchaeota, Nanohaloarchaea

7) , обладают способностью развиваться вне хозяина (Benzerara et al., 2003, 2006; Martel, Young, 2008; Raoult et al., 2008; Ву и др., 2016). Нанобы имеют разнообразные морфотипы: кокковидную, амибовидную, яйцевидную или нитевидную форму (Folk, 1993; McKay et al., 1996; Sillitoe et al., 1996; Uwins et al., 1998). Среди них только ультрамикропрокариоты четко отнесены к живым организмам в соответствии с объемными критериями, выдвинутыми Национальным исследовательским советом (1999), т. е. теоретический минимальный объем клетки (TMCV), достаточный для размещения нуклеиновых кислот и связанного с ними биосинтетического механизма, находится на максимальном уровне. 0,008 мкм3. Хотя эти новые объекты были описаны в естественной среде, относительно мало известно об их экологическом значении.Однако имеющиеся данные свидетельствуют о значительном влиянии на биогеохимические циклы. ЭВ потенциально участвуют в клеточной коммуникации, конкуренции и выживании бактерий (Liu et al., 2019). Взаимодействия между ультрамикропрокариотами и другими сообществами микроорганизмов могут формировать естественную функцию микробиома (Castelle et al., 2018). Аналогичным образом, BMOP включают в себя микроэлементы и белки, что позволяет предположить, что эти объекты могут играть роль в циркуляции и доступности минералов и органических молекул в окружающей среде (Wu et al., 2016). Характеристика биомассы фемтопланктона и разнообразия ее представителей представляется решающей для нашего понимания функционирования водных экосистем.

В этом исследовании мы сообщаем об обнаружении в пресноводном озере Центрального массива (Франция) обильных и сезонно колеблющихся популяций «астроподобных наночастиц» (ALN) с объемами ниже, чем TMCV. ALN демонстрируют типичные и уникальные морфологические признаки. Представлены физико-химические аспекты, плеоморфизм, проточная цитометрия и анализ роста ALN, которые сравниваются с отличительными особенностями живых или неживых частиц аналогичного размера.Сообщается о предварительных попытках доказать поддержку наследственности на основе ДНК.

Материалы и методы

Исследовательские центры и сбор образцов

Пробы были отобраны на поверхности искусственного и сильно эвтрофированного пресноводного озера (площадь поверхности 1,2 га, максимальная глубина 2,5 м) недалеко от Невиля в Центральном французском массиве (45°44’24” с.ш.; 3°27’39” в.д.; высота 465 м). Часть образцов сразу фиксировали 1% (об./об.) формальдегидом и хранили при 4°С до анализа (см. ниже).Нефиксированные образцы доставляли в лабораторию при 4°С и обрабатывали в течение двух часов (см. ниже). В 11 стационарных пробах, отобранных в период с ноября 2016 г. по январь 2018 г., отслеживалась in situ динамика ALN. В таблице 1 приведены физико-химические характеристики воды, проанализированной один раз, в феврале 2017 г.

Таблица 1 . Физико-химические характеристики воды озера на февраль 2017 г.

Обнаружение ALN также проводилось в образцах поверхностного микрослоя 16 выбранных географических станций (а именно, HL1–HL16) из залива Халонг (Вьетнам).Подробная информация об этих образцах и окружающей их среде была представлена ​​в предыдущей работе (Pradeep Ram et al., 2018). ALN количественно определяли на сетках электронной микроскопии, приготовленных, как указано ниже.

ALN, подсчет прокариот и вирусоподобных частиц (VLP) и визуализация

ALN в фиксированных образцах собирали центрифугированием при 15 000 g в течение 20 минут при 14 ° C непосредственно на медные сетки электронной микроскопии 400 меш, покрытые пленкой Formvar с углеродным покрытием (Pelanne Instruments, Тулуза, Франция).Частицы были сверхконтрастированы с использованием солей уранила, как описано в другом месте (Borrel et al., 2012). ALN подсчитывали с помощью просвечивающей электронной микроскопии (TEM) с использованием микроскопа Jeol 1200EX (JEOL, Akishima, Tokyo, Japan) при 80 кВ и увеличении x50 000. Сетки сканировали перед подсчетом, чтобы убедиться, что ALN были распределены случайным образом. Затем была случайным образом выбрана определенная область сетки для подсчета ALN. Подсчеты ALN были преобразованы в ALN на миллилитр с использованием коэффициента преобразования, полученного из контрольных сеток, приготовленных с заранее определенными концентрациями вирусов.Для морфологической характеристики частиц требовалось прямое увеличение от 50 000 до 150 000 раз. Объем частиц ALN был рассчитан путем рассмотрения радиальных ветвей как цилиндров (экстраполяция подтверждена крио-ТЭМ и изображениями SEM; см. Ниже), а центральное ядро ​​​​как сфера. Ультратонкие (толщиной 20 нм) срезы были получены и визуализированы, как описано ранее (Kéraval et al., 2016). Подсчеты прокариот и VLP в фиксированных образцах проводили с помощью проточной цитометрии, как описано в другом месте (Brussaard, 2004), с использованием цитометра BD FACS Calibur (BD Sciences, Сан-Хосе, Калифорния), оснащенного лазером с воздушным охлаждением, мощностью 15 мВт при 488 нм. со стандартным набором фильтров.

Экспериментальный дизайн

Обогащение и культивирование ALN

Образец с наибольшей плотностью ALN, собранный 15 марта 2017 г., использовался для обогащения и культивирования ALN. В течение двух часов после отбора проб 20 л неочищенной озерной воды фильтровали через нейлоновую сетку с размером пор 25 мкм, а фильтраты немедленно концентрировали ультрафильтрацией с тангенциальным потоком с использованием системы Kross-Flow (Spectrum, Бреда, Нидерланды), оборудованной с картриджем с отсечкой 0,2 мкм. Аликвоты этого концентрированного 0.Фракции размером 2–25 мкм последовательно центрифугировали при 8000× г , 10000× г (пеллеты отбрасывали), затем 12000× г в течение 20 мин каждый раз при 14°C. ALN, содержащиеся в супернатанте этого последнего цикла, культивировали при 4°C в темноте с регулярной подачей культуральной среды. Для получения этой культуральной среды ультрафильтрат <0,2 мкм исходного образца озера фильтровали через картридж с отсечкой 30 кДа и автоклавировали. На рисунке 1 показаны культуры ALN, полученные с помощью этой процедуры, по сравнению с необработанными образцами.Осадок, полученный массой 12 000 г , суспендировали в дистиллированной/деионизированной стерильной воде (DDW), центрифугировали при 10 000 г , а надосадочную жидкость сразу замораживали до -20°C для микроскопического анализа и анализа методом проточной цитометрии обогащенных ALN (E -ALN).

Рисунок 1 . Электромикрофотографии, показывающие неоднородность пелагических сообществ (A) в озерной воде, собранной 15 марта 2017 г., и культуру (B) , обогащенную ALN, полученную из этой пробы.Р, прокариот; VLP, вирусоподобная частица; А, АЛН. Шкала баров = 100 нм.

Подробная процедура планирования эксперимента и анализов представлена ​​в дополнительных материалах (рис. S1).

Мониторинг роста

Как указано выше, ALN-культуры обогащали путем последовательного центрифугирования при 8000× г , 10000× г (осадки отбрасывали), затем 12000× г в течение 20 минут каждый раз при 14°C. Для мониторинга роста за этим последовала последовательная фильтрация супернатанта с самой высокой скоростью через 0.Фильтры 45 мкм и 0,2 мкм (Sartorius, Геттинген, Германия) для получения среды, обогащенной ALN, но не содержащей прокариот. Этот фильтрат (<0,2 мкм) разбавляли в культуральной среде в 10 раз (см. выше) и трижды инкубировали в течение 36 дней при 4°С в темноте, затем отбирали 12 нечетных подпроб и фиксировали формальдегидом перед считает. Отсутствие прокариот в начале и конце периода наблюдения за ростом проверяли с помощью проточной цитометрии, просвечивающей электронной микроскопии и посева на чашку с агаром, инкубировали при 4°С и 20°С в течение 4 недель.

Восприимчивость к химическим или физическим агентам

Чтобы ответить на вопрос о живой природе ALN, мы исследовали их восприимчивость к различным химическим (лизоцим, антибиотики) или физическим (тепло) агентам. Лизоцим представляет собой противомикробный фермент, который разрушает клеточную стенку грамположительных бактерий путем гидролиза пептидогликана (Манченко, 1994), а также может действовать против вирусов (Cisani et al., 1984; Lee-Huang et al., 2005). Известно, что лечение антибиотиками, используемое в этом исследовании, блокирует процессы репликации ДНК бактерий или синтез белка (Engle et al., 1982; Дар и др., 2007). Новобиоцин активен главным образом против грамположительных бактерий, гентамицин против грамотрицательных бактерий, а норфлоксацин обладает бактерицидным действием широкого спектра действия. Тепловой шок выше 85°C применялся из-за необратимого физиологического повреждения, вызываемого этим воздействием на биологические объекты (Mackey et al., 1991).

Свободные от прокариот фракции ALN, приготовленные, как описано в разделе « мониторинг роста» , отдельно обрабатывали лизоцимом в концентрации 2 мг/мл (1 час при комнатной температуре), подвергали тепловому шоку (1 час при 90°C) или добавляли добавки с антибиотиками (50 мкг/мл норфлоксацина в стерильной DDW; 10 мкг/мл гентамицина в стерильной DDW или 250 мкг/мл новобиоцина в стерильной DDW) (все химические вещества от Sigma-Aldrich, Saint-Quentin-Fallavier, France).Обработанные образцы инкубировали в течение 20 дней в темноте при 4°С. Чтобы проверить эффективность этих биоцидных обработок, мы использовали две обработанные «контрольные фракции»: культуры бактерий, не содержащие ALN, выделенные из озера Невиль и выращенные на той же культуральной среде, что и ALN, и отфильтрованную через фильтр 0,2 мкм воду VLP, не содержащую ALN, но обогащенную ультрафильтрацией. озеро. Эта вторая контрольная фракция была получена из озера Павин, где ALN не обнаруживаются в течение года. Биоцидные эффекты обработок определяли прямым сравнением обработанных и необработанных.необработанные образцы на 20-й день. ALN, прокариотические и фемтопланктонные сообщества были выполнены на фиксированных формальдегидом образцах в конце инкубации, как описано ранее. Все тесты проводились в трехкратной повторности.

Крио-трансмиссионная электронная микроскопия (Крио-ПЭМ) Подготовка образцов и визуализация

Для крио-ТЭМ 3 мкл нефиксированных суспензий, содержащих ALN, были нанесены на сетки Lacey Carbon с тлеющим разрядом 200 меш и загружены в термостатическую камеру автоматического погружного морозильника Leica EM-GP, настроенного на 20 ° C и 95% влажность.Избыток раствора промокали в течение 1 дюйма фильтровальной бумагой Whatman № 1, и сетку немедленно подвергали мгновенной заморозке в жидком этане, охлажденном до -185°C. Затем образцы переносили на криодержатель Gatan 626 и проводили крио-ПЭМ на микроскопе Jeol 2100, оснащенном катодом LaB 6 и работающем при 200 кВ в условиях низкой дозы. Изображения были получены с использованием программного обеспечения SerialEM (Mastronarde, 2005) с диапазоном расфокусировки 1000 нм на ПЗС-камере Gatan US4000. Это устройство было помещено в конец квантового энергетического фильтра GIF (Gatan Inc., Плезантон, Калифорния), работающий в режиме нулевых потерь энергии, с шириной щели 25 эВ. Изображения записывались с увеличением, соответствующим калиброванному размеру пикселя 1,80 Å или 0,89 Å.

Подготовка и визуализация образцов для сканирующей электронной микроскопии (СЭМ)

Фиксированную суспензию (1% (об./об.) формальдегида), содержащую ALN, наносили фильтрованием на фильтры с размером пор 0,2 мкм (Whatman, Maidstone, UK), затем фиксировали 1% четырехокисью осмия, промывали и обезвоживали. за счет увеличения концентрации этанола, а затем гексаметилдисилазана.После покрытия медным напылением сухие фильтры наблюдались и отображались с помощью СЭМ Zeiss Merlin Compact, работающего при напряжении 2, 3 или 5 кВ (Zeiss, Оберкохен, Германия).

Анализы трансмиссионной электронной микроскопии с фильтрацией энергии (EFTEM) и спектроскопии потерь энергии электронов (EELS)

Наблюдения за нефиксированными образцами проводились с использованием просвечивающего электронного микроскопа Jeol 2010F, работающего на 200 кВ, оснащенного автоэмиссионной пушкой, полюсным наконечником высокого разрешения для сверхвысокого излучения (UHR), устройством STEM, позволяющим проводить Z-контраст визуализация в режиме высокоуглового кольцевого темного поля (HAADF) и энергетический фильтр GIF 200 Gatan.Элементное картирование C, N, O и Ca с помощью EFTEM было выполнено для всего ALN с использованием метода трех окон (Hofer et al., 1997). Для трехоконного метода требуются три изображения с энергетической фильтрацией: два, расположенные перед краем ионизации (изображения до края), которые служат для расчета фона, и одно, расположенное сразу после края (изображение после края). Рассчитанное фоновое изображение было вычтено из изображения пост-края, чтобы получить карту элементов, в которой учитывались изменения формы фона. Карты были рассчитаны для C, N и O K-ребер и Ca L 2,3 ребер с использованием энергетического окна шириной 20 эВ (для C) или 30 эВ (для N, O, Ca) для предварительной -край и пост-край.Изображения с нулевыми потерями были получены путем отбора только упругорассеянных электронов. Спектры EELS были получены с использованием дисперсии 0,2 эВ/канал для записи спектров в диапазоне 270–600 эВ. Энергетическое разрешение составляло 1,3 эВ, измеренное по полной ширине на половине максимума пика нулевых потерь. Время выдержки было оптимизировано для получения достаточной интенсивности сигнала и ограничения повреждения луча. Спектры были скорректированы по множественному рассеянию с использованием процедуры Эгертона, доступной в программе EL/P (Gatan).

Окрашивание нуклеиновыми кислотами, мембранные маркеры и проточная цитометрия (FC) Анализы и сортировка ALN

Нефиксированные суспензии, содержащие ALN, оттаивали при 4°C и разводили в 0.Буфер Tris EDTA с фильтром 02 мкм перед анализом FC. Анализы проводили с использованием четырех красителей нуклеиновых кислот [SYBR Green I (Invitrogen S7563, Пейсли, Великобритания), SYBR Gold (Invitrogen S11494), йодида пропидия (PI) (Sigma-Aldrich P4864) и DAPI (Sigma-Aldrich 32670)] и двух красителей. липофильные мембранные маркеры [FM4-64 (Molecular Probes T13320, Юджин, Орегон) и РХ36 (Sigma-Aldrich P9691)]. ALN были i) окрашены при 80 ° C в течение 10 минут с помощью SYBR Green I или SYBR Gold, как описано в Brussaard (2004); ii) предварительно нагревали до 80°C в течение 10 мин, затем окрашивали 10 мкг·мл -1 PI или 1 мкг·мл -1 DAPI в течение 10 мин в темноте.Нуклеиновые кислоты также окрашивались без нагревания. Окрашивание ФМ4-64 (5 мкг·мл -1 ) и ПХ36 (разведение 1/500 коммерческим раствором) проводили в темноте в течение 10 мин при комнатной температуре. Все экспериментальные условия воспроизводились в трехкратной повторности. Для биологического контроля использовали три повторения 0,2 мкм фильтрованной воды из озера, не содержащей ALN (т. е. воду, обогащенную VLP из озера Павин), и культивируемых бактерий из озера Невиль. Цитометрический анализ проводили на проточном цитометре BD FACSAria Fusion SORP (BD Biosciences), оснащенном насадкой 70 мкм.Конфигурация лазера и фильтра была следующей: DAPI возбуждался УФ-лазером с длиной волны 355 нм, флуоресценция регистрировалась с помощью длинного прохода 410 (LP) и полосы пропускания 450/50 (BP). SYBR Green I и SYBR Gold возбуждали при 488 нм и регистрировали флуоресценцию с помощью 502 LP и 530/30 BP. PI и FM4-64 возбуждали при 561 нм и регистрировали флуоресценцию при 600 LP и 610/20 BP для PI и при 685 LP и 710/50 BP для FM4-64. ПХ36 возбуждали при 561 нм и регистрировали флуоресценцию при 582/15 п.н.Целевые частицы визуализировали на точечной диаграмме «маркерная флуоресценция против бокового рассеяния». Данные были получены и обработаны с использованием программного обеспечения FACSDivA 8 (BD Biosciences). Характеристика ALN и VLP из образцов, обработанных для цитометрического анализа, была проведена с помощью TEM, как описано ранее. Графики сравнивали с таковыми сообщества VLP, обработанного аналогичным образом, полученного из озера Павин (см. описание участка в Borrel et al., 2012) 24 октября 2017 г. Сортировку FC проводили на образцах, окрашенных SYBR Green I в условиях без нагрева для оптимальное сохранение морфологии ALN и надежная диагностика морфотипа.Обычно описываемые «вирусные фракции» (Brussaard, 2004) гейтировались на флуоресценции SYBR Green I и отсортировывались с использованием непрерывного режима «Purity». Флуоресцентные шарики размером 0,5 мкм (Polysciences, Warrington, PA) служили контрольной отсортированной фракцией. Частицы из отсортированных ворот были повторно проанализированы с помощью FC, идентифицированы и подсчитаны с помощью TEM.

Геномный анализ

Экстракция и амплификация нуклеиновых кислот

Геномную ДНК экстрагировали из нефиксированных суспензий, содержащих ALN, полученных, как описано в разделе « Мониторинг роста ».Образец собирали центрифугированием при 12 000 g в течение 20 мин при 14°C. Осадок ресуспендировали в 500 мкл стерильной DDW и смешивали с 600 мл насыщенного фенола (pH 8,0). Затем проводили два цикла замораживания на бане с жидким азотом (15 мин) и оттаивания на водяной бане при 100°С (5 мин). Образец смешивали с 750 мкл хлороформа и центрифугировали при 14 000 g в течение 20 мин при 4°C. После этого водный слой переносили в другую свежую микропробирку объемом 1,5 мл и смешивали с таким же объемом холодного абсолютного этанола и 3 М ацетата натрия.Осадок нуклеиновой кислоты, полученный центрифугированием при 14000 g в течение 20 мин при 4°C, дважды промывали ледяным 70%-ным этанолом и снова осаждали. Осадок ресуспендировали в 50 мкл деионизированной воды. Всего выделенную ДНК случайным образом амплифицировали с помощью полногеномной амплификации (WGA) с помощью набора GenomiPhi V2 (GE Healthcare, Чикаго, Иллинойс, США).

Подготовка библиотеки и секвенирование

Секвенирование одной молекулы в режиме реального времени выполняли с помощью секвенатора PacBio Sequel Sequencer (Pacific Biosciences, Менло-Парк, Калифорния, США).Библиотеку SMRTBell готовили с использованием набора для подготовки ДНК-матрицы 1.0 в соответствии с протоколом «процедура и контрольный список для матрицы размером более 10 т.п.н. с использованием гранул AMPure PB». Геномную ДНК (1,7 мкг) слегка разрезали с использованием Covaris g-Tube (Covaris, Великобритания), получая фрагменты ДНК размером приблизительно 20 т.п.н. Анализатор фрагментов (Agilent Technologies, Санта-Клара, Калифорния, США) использовали для оценки распределения фрагментов по размерам. Разрезанная геномная ДНК была использована в первой ферментативной реакции для удаления одноцепочечных выступающих частей с последующей обработкой ферментами репарации для восстановления любых повреждений, которые могут присутствовать в остове ДНК.Реакция лигирования тупых концов с последующей обработкой экзонуклеазой была проведена для создания матрицы Bell SMRT. Две бусины AMPure PB 0,45-кратной очистки и одну 0,4-кратную очистку использовали для получения окончательной библиотеки. Библиотека SMRTBell была проверена на качество и количественно определена на анализаторе фрагментов (Agilent Technologies) и флуориметре Qubit с набором для анализа реагентов Qubit dsDNA HS (Life Technologies). Готовый к секвенированию полимеразный комплекс SMRTBell создавали с использованием набора для связывания 2.1 (PacBio) и праймера V4, применяли протокол диффузионной загрузки в соответствии с инструкциями производителя.Прибор PacBio Sequel был запрограммирован на загрузку и секвенирование образца на клетках PacBio SMRT v2.0 (Pacific Biosciences), получая один фильм продолжительностью 600 минут на клетку SMRT и генерируя 8 ГБ оснований и вставку N50 размером 7,75 КБ.

Сборка последовательности и аннотация

1 930 845 необработанных прочтений PacBio (в среднем 4,1 КБ) были собраны с использованием программного обеспечения SMRT Analysis и рабочего процесса Hierarchical Genome Assembly Process (HGAP) (Chin et al., 2013). Эта процедура включает в себя исправление ошибок перед сборкой, сборку и полировку.Круговая природа контигов, полученных из HGAP, была оценена с помощью инструмента для точечного построения Gepard (Krumsiek et al., 2007), а кольцевые последовательности генома были получены с помощью подхода выравнивания и ручного курирования. 5162 исправленных длинных считывания (в среднем 12,6 КБ), созданных после процесса исправления ошибок перед сборкой, использовались для определения охвата каждого контига с использованием BLASTn (порог 90% для процента идентичности) (Altschul et al., 1997). Эти скорректированные чтения и контиги сравнивали с помощью BLASTn с эталонной базой данных генов рРНК SILVA 16S (версия 132) (Quast et al., 2013). 233 контига также сравнивали с базой данных белков UniProt (февраль 2019 г.) (UniProt Consortium, 2019 г.) с использованием Diamond (чувствительный режим) (Buchfink et al., 2015). Вызов генов был выполнен на контигах с помощью программного обеспечения Prodigal (Hyatt et al., 2010), и белки также сравнивались с Uniprot с использованием Diamond. Геномные данные представлены в дополнительном листе данных 1.

Результаты

Морфологические анализы

Форма ALN соответствует сегментам в виде рук, которые радиально отходят от уникальной структуры ядра.По размеру и количеству рук выделились три доминирующих морфотипа. Первый морфотип имел от 4 до 10 ветвей, соединенных с треугольным хвостом, средней длиной 110 ± 18 нм и средним объемом 0,000055 мкм3 (рис. 2А–Е). Второй морфотип состоял из форм с 11 плечами, которые постоянно наблюдались в популяции ALN (рис. 2G-K). Они четко отличались от первого морфотипа по длине (333 ± 28 нм) и объему (среднее значение: 0,00057 мкм3). Некоторые из них, по-видимому, были наделены своеобразным бутообразным отростком, который, казалось, возникал из центра симметрии частицы.Этот отросток толще и немного длиннее, чем лучевые отростки (рис. 2I-K). Наконец, третий морфотип ALN соответствует субпопуляции, состоящей из 20 рук (рис. 2L-P). Эти 20-лучевые формы представляли собой самые длинные (439 ± 39 нм) и самые объемные (0,0014 мкм3) ALN, выявленные в наших образцах. Их руки имели характерную конусообразную форму, часто были связаны парами (рис. 2P), и не было признаков дополнительных выростов, как у других морфотипов ALN.

Рисунок 2 . Трансмиссионная электронная микроскопия (ПЭМ) микрофотографии различных морфотипов звездообразных наночастиц (ALN). (A–F) 4–10-лучевые формы, некоторые (A–D) представляют несколько рук, сочлененных вокруг дельтовидного нароста (стрелки). (Г–К) 11-плечевые формы и их почкующиеся 11-плечевые варианты (И–К) с удлиненными и вздутыми почковидными выростами (стрелки). (L–P) 20-рукие формы. Шкала баров = 100 нм.

Стандартная, сканирующая и криотрансмиссионная электронная микроскопия (крио-ПЭМ) показали, что плечи частиц ALN выступают из центрального ядра (рис. 3A–D). Это ядро ​​​​продемонстрировало высокую и однородную электронную плотность, в то время как плечи показали дифференциальный контраст в зависимости от плоскости сечения. Руки выглядели как полые структуры при просмотре в сагиттальных разрезах (рис. 3C). Крио-ТЕМ целых образцов позволил провести прямое сравнение между центральным ядром, радиальными ответвлениями и дополнительным отростком 11-лучевых морфотипов (рис. 3D, E).Во всех областях наблюдался похожий точечный рисунок, который был более заметен в случае комплекса центральное ядро/аппендикс. Разветвленные цепочки, образованные этими элементарными компонентами, могут объяснить более высокий электронный контраст и кажущуюся жесткость нештатного отростка по сравнению с более слабым аспектом лучевых ветвей.

Рисунок 3 . Электромикрофотографии астроподобных наночастиц (ALN). (A, B) Микрофотографии, полученные с помощью сканирующей электронной микроскопии (СЭМ), показывающие ALN с несколькими полноценными радиальными ответвлениями (A) или сочетанием формирующихся (стрелка) и полностью сформированных ответвлений (B).(C) TEM микрофотография ультратонкого среза ALN. Сагиттальные срезы рук имеют трубчатую форму с областью электронного света, окруженной стенообразной структурой (стрелки). (D,E) Микрофотографии крио-ПЭМ. (D) Радиальные рычаги имеют похожий пятнистый вид. (E) Увеличенный вид коробки, выбранной на предыдущем изображении, на котором видны круглые подструктуры (стрелка). Шкала баров = 100 нм.

Описательно, ALN представляют собой плеоморфные наночастицы с уменьшенным биообъемом (<0,0.0014 мкм3), демонстрирующий от 4 до 20 радиальных рукавов, организованных вокруг уникального центрального ядра.

Элементарный анализ

Просвечивающая электронная микроскопия с фильтрацией энергии и спектроскопия потерь энергии электронов (EELS), проведенные на целых ALN, показали, что эти наночастицы в основном состоят из углерода, кислорода, кальция и азота (рис. 4A, B). Следовые количества калия были также идентифицированы в связи с частицами. Спектры EELS на CK-крае и Ca L 2,3 -краях ALN значительно отличались от спектров Ca-карбонатов, используемых в качестве эталона (рис. 4C), поскольку они не демонстрировали пик при 290 эВ, указывающий на 1s → π * электронных переходов в карбонатах и ​​гораздо более низкое соотношение Ca/C.Точно так же электронная дифракция ALN на выбранной области выявила аморфную структуру (личное сообщение KB).

Рисунок 4 . Просвечивающая электронная микроскопия с фильтрацией энергии (EFTEM) (A) и спектроскопия потерь энергии электронов (EELS) анализируют (B, C) звездообразных наночастиц (ALN). (A) Изображение с нулевыми потерями и карты EFTEM C, O и Ca ALN. Масштабная линейка = 200 нм. (B) Спектры EELS частицы ALN (синий) и формвара (красный).Вставка: крупный план нормализованного по фону спектра частицы ALN на N- и O-K-краях. (C) Спектры EELS эталонного кристалла кальцита на CK-крае и Ca L2,3-краях. Относительные интенсивности на C K-крае и Ca L2,3 краях коррелируют с атомным отношением C/Ca.

Таким образом, элементный состав и картины электронной дифракции в выбранных областях предполагают, что ALN предположительно образованы из органических компонентов, что указывает на то, что их органическая природа может преобладать над возможностью минеральной структуры.

Анализ проточной цитометрии

Анализы проточной цитометрии (FC) были выполнены на обогащенной ALN-фракции (E-ALN, см. Материалы и методы ), состоящей из 96% ALN и 4% VLP (рис. 1B), подтвержденных наблюдением и подсчетом с помощью TEM.

При использовании липофильных маркеров ФМ4-64 или ПКХ36 сигнал флуоресценции не получен. Были испытаны различные красители нуклеиновых кислот, в том числе DAPI, PI, SYBR Green I, SYBR Gold. В то время как мечение с помощью DAPI (слабо проникающий краситель, селективный к AT) и PI (непроницаемый краситель, интеркалирующий нуклеиновые кислоты) не увенчалось успехом, красители SYBR (проницаемые цианиновые красители), которые являются более чувствительными соединениями с высокой проникающей способностью, позволили отделить отдельные популяции от E -образцы АЛН.Как показано на рисунке 5A, три популяции, обозначенные как P1, P2 и P3, были воспроизводимо разделены на основе интенсивности сигнала SYBR Green I и бокового рассеяния. Поскольку было показано, что ALN являются термочувствительными, нагревание было исключено в протоколе, используемом для мечения SYBR. TEM показала ALN знакомой формы во всех отсортированных воротах, за исключением ворот P4, которые содержали исключительно шарики, используемые в качестве контроля для контроля качества сортировки (рис. 5B). Отсутствие ALN в P4 указывало на неслучайную, но дифференциальную сортировку наночастиц с использованием выбранных сортировочных ворот.Это было подтверждено ПЭМ-анализом ALN из трех сортировочных ворот (рис. 5B). Субпопуляция из ворот P3 давала самый сильный сигнал SYBR и состояла из крупных морфотипов ALN, то есть 20-лучевых, почкующихся 11-лучевых и 11-лучевых морфотипов. Более мелкие ALN (4-10 вооруженные формы) были в основном сосредоточены в воротах P1 и P2 вместе с вирусоподобными частицами и частицами аналогичного размера неопределенной природы (VLP).

Рисунок 5 . Анализ проточной цитометрией астроподобных препаратов, обогащенных наночастицами (E-ALN). (A) Включение трех различных популяций (P1, P2, P3) E-ALN, окрашенных в зеленый цвет SYBR. Во время процедуры окрашивания нагревание не применяли, и в качестве контрольной фракции (P4) использовали шарики (0,5 мкм). Серая область на диаграмме рассеяния, включая P1, P2 и P3, обычно представляет фракции VLP (см. Brussaard, 2004). Круговая диаграмма показывает относительные пропорции морфотипов ALN, подтвержденных TEM. (B) Распределение морфотипов и гранул ALN в четырех фракциях, отсортированных с помощью FACS, подсчитанных с помощью ПЭМ. C Средние значения трехкратной повторности и стандартные ошибки нанесены на график. На значительную репрезентативность морфотипов в отсортированных популяциях (В) указывают символы: ¤ (точный критерий Фишера по таблице сопряженности, p < 0,01). Существенные различия между «ненагретыми» и «нагретыми» условиями (C) обозначены символом ¤ (Стьюдент T -тест, p < 0.05).

Взаимовлияние между ALN и VLP при количественном определении частиц FC оценивали с использованием свойства термочувствительности ALN по сравнению с VLP. Это было достигнуто посредством сравнительного анализа E-ALN и сообщества VLP, используемого в качестве контроля без ALN, подвергнутого или не подвергнутого нагреванию (рис. 5C). Тепло вызывало значительное увеличение подсчитанных ВПЧ в P2 (с 4,8 ± 0,7 до 8,2 ± 1,1 × 10 6 мл -1 ) и P3 (с 1,7 ± 0,2 до 2,0 ± 0,3 × 10 6 мл -1 ). ) популяции, отсортированные от контроля без ALN.Нагревание Р2 и Р3, отсортированных из Э-АЛН, приводило к обратному эффекту, т. е. к уменьшению количества зарегистрированных событий (Р2: с 5,8 ± 0,6 до 4,2 ± 0,4 × 10 6 мл -1 ; Р3: с от 1,8 ± 0,2 до 0,9 ± 0,1 × 10 6 мл -1 ).

В целом, ALN положительно метятся красителями нуклеиновых кислот SYBR и мешают количественному определению VLP при использовании методов на основе флуоресценции.

Обнаружение нуклеиновых кислот

Обнаружение нуклеиновой кислоты было выполнено на фракции, состоящей из >99 % ALN и <1 % VLP, что было установлено с помощью ПЭМ и получено, как описано в разделе « мониторинг роста ».

Никакие риды или контиги не были похожи на последовательность прокариотической 16S рРНК. Все 233 контига были короче 6 т.п.н., за исключением одного контига размером 11 258 п.н. Почти все контиги могут быть однозначно связаны с небольшими одноцепочечными ДНК-вирусами, 213 из которых принадлежат к семейству Microviridae, а 16 — с ДНК-вирусами CRESS (циклические Rep-кодирующие одноцепочечные ДНК-вирусы) (рис. 6). Два контига не имели сходства с белками Uniprot, а один контиг был подобен бактериальной ДНК-ориентированной ДНК-полимеразе (49,5 идентичности аминокислот на 94 остатках), но все эти контиги были очень короткими (1300, 115 и 290 п.н. соответственно).Хотя самый большой контиг из 11 258 п.н. не имел очевидной принадлежности, его характеристики аналогичны известным вирусам, инфицирующим прокариоты: (i) короткие гены (23 гена, кодирующих белок, в среднем 442 п.н.), (ii) отсутствие переключения цепей и (iii ) только 4 белка из 23 сходны с белком Uniprot (3 сходны с белками неаффилированных фагов и один с архейным белком, все четыре белка имеют неизвестную функцию).

Рисунок 6 . Таксономическая принадлежность 233 контигов из ДНК-матриц, обогащенных ALN.Каждая часть круговой диаграммы соответствует контигу, и его размер пропорционален количеству операций чтения, связанных с этим контигом.

На основании наших геномных анализов и использованной методологии присутствие нуклеиновых кислот в ALN не доказано.

Восприимчивость к химическим или физическим агентам

После 20-дневной инкубации в качестве контроля были протестированы эффекты различных ингибирующих жизнь обработок на ALN, а также на прокариотах без ALN и фемтопланктонных сообществах, используемых в качестве контроля.

Значительное влияние на общее количество ALN (тест T , p <0,05) наблюдалось (рис. 7) после нагревания в течение 1 ч при 90°C или обработки лизоцимом (2 мг/мл) (80 ± 12% и 51 ± 19 % потерь через 20 дней инкубации), а в присутствии антибиотиков норфлоксацина (50 мкг/мл) и новобиоцина (250 мкг/мл) (85 ± 7 % и 58 ± 8 % соответственно). Лечение антибиотиками гентамицином оказало меньшее влияние на наночастицы (потеря 41 ± 17%; p = 0,05). Потери были более выраженными после нагревания, обработки лизоцимом, норфлоксацином, новобиоцином и гентамицином для 4-10-лучевой формы (96 ± 1, 53 ± 15, 89 ± 5, 61 ± 8, 41 ± 14% соответственно) по сравнению с 11-плечие формы (0 ± 10, 37 ± 4, 66 ± 2, 53 ± 1, 12 ± 4% соответственно).

Рисунок 7 . Чувствительность частиц к теплу, антибиотикам или лизоциму. Эффекты обработки нагреванием, антибиотиками и лизоцимом оценивали по сравнению с необработанным контролем на 20-й день. Результаты выражены в виде процента ALN, которые устойчивы к обработке и продолжают развиваться по сравнению с контролем после 20-дневной инкубации. В качестве контроля использовали прокариотические культуры без ALN и фемтопланктонные сообщества (фильтрованная вода 0,2 мкм из эвтрофного озера).Средние значения трехкратной повторности и стандартные ошибки нанесены на график. Значимые различия с контролем обозначены символом ( T — тест, p < 0,05).

Обработка лизоцимом привела к увеличению числа прокариот (58%), что позволяет предположить, что эта свободная от ALN фракция в основном состоит из видов Gram. Полная потеря фемтопланктонных сообществ без ALN (99%) свидетельствует о сильной противовирусной активности этого фермента (Cisani et al., 1984; Lee-Huang et al., 2005). Как и ожидалось, прокариотическая «контрольная фракция» продемонстрировала резкую потерю норфлоксацина, гентамицина и новобиоцина в ответ на нагревание (100%, 100%, 57%, 41% соответственно) (рис. 7).

Ясно, что ALN восприимчивы к ингибирующим жизнь методам лечения. Стоит также отметить, что ответы на лечение различались в зависимости от морфотипов. Например, 11-лучевые морфотипы оказались гораздо более устойчивыми, чем другие, тогда как 4-10-лучевые оказались более чувствительными к воздействиям.

In vitro Мониторинг Популяция

ALN колеблется в течение 36-дневного периода в среде без прокариот (PFM) при 4°C (рис. 8). Временный рост численности был очевиден с 0-го по 1-й день (коэффициент размножения MF = 3.6). Затем популяция казалась относительно стабильной с 1-го по 15-й день перед заметным снижением до 20-го дня, предшествующим второму периоду подъема с 20-го по 29-й день (MF = 3,3), а затем второй фазе снижения до 36-го дня. колебания во времени были статистически значимыми (рис. 8). Количественная оценка морфотипов ALN в PFM показала, что морфотипы с 4–10 и 11 плечами колеблются обратно пропорционально во времени (рис. 8, r = -0,86 по Спирмену, p <0,001). Эти колебания положительно (4–10-лучевые формы) или отрицательно (11-плечевые формы) коррелировали с общей популяцией ALN ( r Спирмена = 0.66 и r = -0,82 соответственно, p < 0,05). Доля самых маленьких форм ALN (преобладающий морфотип в 0-й день) увеличивается одновременно с общим количеством ALN, но уменьшается по мере того, как количество общих ALN возвращается к исходному уровню (0-й день, 20-й день и 36-й день). Наоборот, доля 11-руких форм увеличивается во время фаз общего снижения ALN (дни 20, дни 36). В течение всего инкубационного периода нам не удалось обнаружить ни одной прокариотической клетки с помощью различных подходов: проточной цитометрии, просвечивающей электронной микроскопии и посева на чашку с агаром.

Рисунок 8 . Мониторинг развития астроподобных наночастиц (ALN) в среде без прокариот. Временные вариации обилия ALN и соотношения (в %) различных морфотипов за 36-дневный период. Средние значения трехкратной повторности и стандартные ошибки нанесены на график. Значимые различия между содержанием ALN в t (n) и t (0) и между содержанием ALN в t (n) и t (n-1) обозначены символами ¤ и , соответственно ( T -test, p < 0,05).

Приведенный выше мониторинг инкубации показывает, что количество ALN может значительно меняться с течением времени в отсутствие клеточных объектов, при этом разные модели регистрируются в контрастных категориях морфотипов. Механизмы этих изменений остаются неясными в отсутствие обнаруживаемой геномной поддержки.

Экосистемный мониторинг

Анализ природных проб, собранных за 13-месячный период в эвтрофном озере Центрального французского массива, выявил высокую численность ALN, характеризующуюся выраженными сезонными колебаниями (рис. 9).Максимальная плотность достигала значения 9,0 ± 0,5 × 10 90 728 7 90 729 мл 90 728 -1 90 729 (15 марта 2017 г.). Обилие ALN было в 8 раз выше, чем у прокариот, подсчитанных FC, и составляло до 39% от общего количества VLP, подсчитанных FC, в соответствующих образцах. Численность ALN увеличивалась с сезоном от осени до весны (MF = 60). Численность прокариот медленно колебалась от 0,8 ± 0,1 до 2,1 ± 0,4 × 10 90 728 7 90 729 мл 90 728 -1 90 729 , тогда как VLP колебалась от 2,0 ± 0,2 до 48,4 ± 1,5 × 10 90 728 7 90 729 частиц мл 90 728 -1 90 729 .Для обоих сообществ самые высокие значения были зарегистрированы весной и осенью соответственно (рис. S2). Численность ALN не коррелировала с численностью прокариот или VLP.

Рисунок 9 . Обилие астроподобных наночастиц (ALN) in situ (Neuville-France) и соотношение (в %) различных морфотипов за 15-месячный период. Обратите внимание на пик численности в период с конца декабря 2017 г. по середину марта 2017 г. и возвращение к популяциям с низкой плотностью в течение нескольких месяцев. Средние значения трехкратной повторности и стандартные ошибки нанесены на график.Значимые различия между обилием ALN и предыдущим временем отмечены звездочками (тест Стьюдента T , p <0,05).

На уровне морфотипа мы наблюдали высокое преобладание 11-плечих форм, которые в среднем составляли 79 ± 16% от общей численности за 13-месячный период выборки (рис. 9). 4-10- и 20-лучевые формы встречались в гораздо меньших количествах (средние значения = 10 ± 11% и 11 ± 11% соответственно). Пропорции этих двух форм обратно коррелировали с пропорциями 11-руких форм с течением времени (г Спирмена = -0.77 и r = -0,73 соответственно, p < 0,05). Пропорции почкующихся 11-плечевых форм и 11-плечевых форм, лишенных почковидного отростка, также отрицательно коррелировали друг с другом (r = -0,91 по Спирмену, p <0,01). Почкующиеся формы составляли самую высокую долю в начале и на протяжении всей фазы увеличения общего количества ALN, но затем исчезали с уменьшением общего количества ALN. ALN состояли исключительно из 11-плечих морфотипов через несколько месяцев после того, как их популяция стабилизировалась на самом низком уровне.

Обнаружение ALN, проведенное на поверхностном микрослое 16 выбранных географических станций (а именно, от HL1 до HL16) из залива Халонг (Вьетнам), показало высокую пространственную неоднородность со значениями в диапазоне от неопределяемых до 3,4 × 10 4 мл −1 (рис. 10А). Динамика ALN и бактерий была значительно коррелирована (r = 0,81 по Спирмену, p <0,01, рисунок 10B). Не удалось установить надежную корреляцию между ALN и физико-химическими переменными (рис. 10B).

Рис. 10. (A) Распределение астроподобных наночастиц (ALN) и численности бактерий на 16 выбранных станциях тропической прибрежной экосистемы (залив Халонг – Вьетнам) и (B) анализ корреляций (продукт Спирмена -моментный коэффициент корреляции) между ALN и параметрами окружающей среды, которые составляют все точки отбора проб. Все подробности об окружающей среде залива Халонг (Вьетнам) можно получить у Pradeep Ram et al. (2018). Уровень значимости: * p < 0.001. VA, численность вируса; BA, обилие бактерий; BP, бактериальная продукция; FIC, частота инфицированных клеток; ТЕМП, температура; САЛ, соленость; Турб, мутность; DOC, растворенный органический углерод; TPC, общее количество твердых частиц углерода; TPN, общий азот в виде твердых частиц в объемной пробе.

ALN показывают сезонные и экосистемные колебания, вероятно, вызванные параметрами окружающей среды. Пропорции каждого зарегистрированного морфотипа меняются в соответствии с сезонной динамикой.

Обсуждение

ALN являются исходными плеоморфными наночастицами

Здесь мы сообщаем об обнаружении «астроподобных наночастиц» (ALN) в озерной воде.Эти плеоморфные образования имеют загадочные астероподобные формы с отростками в виде рук, выступающими из центрального ядра (рис. 3). Все морфотипы демонстрируют формы, которые отличают ALN от ранее установленных групп наночастиц, включая ультрамикропрокариоты (Duda et al., 2012; Castelle et al., 2018; Ghuneim et al., 2018), спорные нанобы (Folk, 1993; Sillitoe et al., al., 1996; Uwins et al., 1998; Aho and Kajander, 2003; Yaghobee et al., 2015), биомиметические минерало-органические частицы (БМОП) (Wu et al., 2016), вирусы (King et al., 2018) или внеклеточные везикулы (EVs) (Soler et al., 2015; Biller et al., 2017). Их средняя длина колеблется от 110 ± 18 нм (4–10-лучевой морфотип) до 439 ± 39 нм (20-лучевой морфотип). Объемные оценки всех типов ALN показали значения (в среднем 0,000055 мкм3, 0,00057 мкм3 и 0,0014 мкм3 для 4-10-, 11- и 20-лучевых морфотипов соответственно), которые были значительно ниже по сравнению с самыми маленькими известными прокариотами (Ghuneim et al., 2018). ) и теоретическому минимальному объему ячейки (TMCV).Нанобы, BMOP, вирусы (за исключением гигантских вирусов) и EV являются единственными примерами сущностей, сравнимых с ALN с точки зрения числового объема. Состав (в основном углерод, кислород, кальций и азот со следовыми количествами калия) и аморфная структура, выявленная с помощью электронной микроскопии (рис. 4), указывают на то, что ALN являются возможными органическими частицами (Uwins et al., 1998; Benzerara et al., 2003), или, по крайней мере, что их органическое содержание может преобладать над их минеральным составом, известным из минералообразующих нанобов (Kajander et al., 2003), BMOP или «природные наночастицы» (Wu et al., 2016; Griffin et al., 2018), частично или полностью состоящие из минералов.

Объем

ALN был в значительной степени ниже теоретического минимального объема клетки (TMCV), необходимого для размещения нуклеиновых кислот и связанных с ними механизмов биосинтеза, необходимых для самодостаточной формы жизни (National Research Council, 1999). Однако использование TMCV, установленного 20 лет назад для определения совместимости с живой природой, следует рассматривать с осторожностью. Действительно, последние достижения микробиологии и вирусологии выявили существование наноразмерных прокариот с биообъемами, близкими к TMCV.Сообщалось также о гигантских вирусах. Геномный анализ наноразмерных прокариот выявил ограниченную субклеточную организацию в сочетании со значительным сокращением путей биосинтеза и энергосбережения (Castelle et al., 2018; Ghuneim et al., 2018). Между тем были обнаружены исключительно крупные вирусы, содержащие ДНК, кодирующие белки, участвующие в трансляции мРНК (Schulz et al., 2017; Abrahao et al., 2018). Эти открытия вновь открыли дискуссию о происхождении и определении жизни.В отсутствие научного консенсуса относительно того, каким именно должен быть TMCV, возможно, было бы преждевременно делать вывод о том, что ALN не могут быть живыми частицами, единственным критерием которых является их исключительно малый размер. Для решения этой проблемы были разработаны различные экспериментальные подходы (см. ниже).

Способность ALN развиваться в отсутствие клеток (рис. 8) обеспечивает дополнительные точки входа для обсуждения природы этих частиц по сравнению с вирусами или внеклеточными везикулами (EV).Здесь представляется целесообразным подчеркнуть, что независимый от хозяина морфогенез весьма необычен для вирусного мира или для ЭВ, хотя о внеклеточной морфологической пластичности сообщалось для вирусов ATV (Acidianius Two-tailed Virus) , которые заражают археи, живущие в особенно суровые водные среды (Häring et al., 2005; Prangishvili et al., 2006). Колебания морфотипа ALN, происходящие в отсутствие клеток, кажутся противоречащими вирусной природе ALN, если рассматривать их как постепенные процессы сборки/разборки внутри одной частицы, ведущей плеоморфный образ жизни.Однако необходимо также учитывать альтернативу, т. е. конвергенцию наночастиц, не связанных друг с другом, к «звездообразной» морфологии. В этом случае флуктуации морфотипа могут просто отражать способность к выживанию неродственных частиц в отсутствие клеток. Ясно, что необходимы дальнейшие исследования для выяснения флуктуаций морфотипа, связанных с точной природой ALN.

Чувствительность к широкому спектру антибиотиков использовалась в качестве критической точки для установления неживой природы биомиметических частиц (Raoult et al., 2008). На количество ALN сильно повлияли биоцидные агенты (норфлоксацин, новобиоцин, лизоцим или тепловой шок) (рис. 7). Эти результаты могут свидетельствовать о том, что ALN являются самодостаточными формами жизни. Следует также учитывать дифференциальные ответы морфотипов ALN на множественные повреждающие воздействия. 4-10-лучевые формы оказались более пораженными, чем 11-лучевые формы, что указывает на возможность более устойчивых морфотипов в популяции наночастиц. Сравнение ответов ALN с ответами других популяций, использованных в качестве контроля, не позволило, однако, сделать более определенные выводы, свидетельствующие о живой или неживой природе этих частиц.

В более общем плане способность популяций ALN сохраняться в отсутствие клеток и чувствительность частиц к биоцидным агентам поднимают вопрос о существовании эндогенных нуклеиновых кислот. Гипотеза поддержки наследственности также подтверждается повторным появлением различных морфотипов ALN независимо от контекста окружающей среды или времени года (см. Ниже) и повторяющейся радиальной симметрией частиц, которая может отражать отношения развития между морфотипами.Графики проточной цитометрии (FC) и последующий анализ TEM отсортированных ALN предоставили предварительные сведения по этой теме. Стадию цитометрии оценивали с использованием проникающих цианиновых красителей SYBR. Эти красители предпочтительно связываются с двухцепочечной ДНК, но также могут окрашивать одноцепочечные ДНК и РНК с различной эффективностью. ПЭМ-анализ отсортированных фракций показал, что интенсивность сигналов SYBR Green I и бокового рассеяния зависела от морфотипа и позволила установить положительную корреляцию между сложностью морфотипов и интенсивностью флуоресценции, испускаемой частицами (рис. 5).Предполагая, что окрашивание SYBR с помощью FC указывает на присутствие нуклеиновых кислот, заключенных в наночастицу (структура ядра?), высокообогащенные культуры ALN (фильтрация 0,2 мкм) оказались подходящим материалом, из которого предполагаемая ДНК могла быть непосредственно извлечена и охарактеризована при молекулярном уровне. Затем было разработано секвенирование всего генома с использованием той же матрицы ДНК. Гены 16S рРНК не были идентифицированы как часть 233 контигов, собранных с помощью этого подхода (рис. 6). Предполагая, что выделение и амплификация ДНК были эффективными, наши данные свидетельствуют о том, что в ALN отсутствуют обнаруживаемые геномные особенности и механизм трансляции прокариот.Подавляющее большинство контигов, доставленных с помощью полногеномного анализа, принадлежали к микровирусам, семейству бактериофагов с геномом из одноцепочечной ДНК. Однако контиги микровирусов следует рассматривать как наборы фрагментов последовательностей из остатков вирусных популяций, изначально содержащихся в пробе воды озера. В соответствии с этими результатами мы не смогли продемонстрировать наличие нуклеиновых кислот в ALN. Эффективность экстракции и неспецифической амплификации нуклеиновых кислот тесно связана с природой частицы.Разработка специального протокола для очищенных культур, обогащенных ALN, станет критическим моментом, как только будет определена точная природа ALN.

В целом, наши данные об атипичной морфологии, сниженном биообъеме, предполагаемой доминирующей органической природе, чувствительности к обработке биоцидами и способности развиваться в отсутствие клеток указывают на то, что ALN являются новыми фемтообъектами, которые на данный момент не могут быть отнесены ни к одной из известных категорий фемто-сущностей, ранее описанных в образцах окружающей среды.

Экологическое значение ALN

Наше открытие ALN и существование других сверхмалых невирусных частиц поднимает экологический вопрос о точности фракции «VLP» (то есть вирусоподобных частиц) в водных экосистемах. Аббревиатура VLP, обычно используемая для обозначения свободно встречающихся вирусов, также является синонимом «известных и еще неизвестных вирусных водных частиц», тем более что стандартизированные методологии FC включают процедуры, управляемые нагреванием, особенно эффективные для обнаружения вирусных частиц, которые в противном случае являются рефрактерными или слабо реагируют на окрашивание SYBR (Brussaard, 2004).Интерференция между ALN и VLP при количественном определении частиц FC и успешная сортировка крупнейших морфотипов (рис. 5) указывают на то, что ALN следует рассматривать как атипичные наночастицы, входящие в состав фракции VLP. События, зарегистрированные с помощью ALN, могут привести к переоценке вирусной нагрузки при анализе виромов в водных экосистемах путем подсчета частиц, окрашенных SYBR, что является методологией, используемой в настоящее время для оптимального обнаружения вирусов с помощью проточной цитометрии (Weinbauer, 2004). Экспериментальная систематическая ошибка, вызванная перекрытием флуоресцентных сигналов, производимых вирусами и другими типами наночастиц, включенных в вирусную популяцию, ранее оценивалась в случае EV, которые составляют обычные компоненты фракций VLP в естественной среде (Soler et al., 2008, 2015; Фортерре и др., 2013). Поэтому сравнительные исследования между экологическими группами, составляющими вирусные сообщества, следует интерпретировать с осторожностью, когда в образцах встречаются плеоморфные наночастицы, такие как ALN, особенно когда сезонные изменения благоприятствуют временному цветению или преобладанию одного морфотипа ALN над другими.

Экологическая значимость ALN была определена с помощью in situ сезонных и экосистемных анализов. Сезонный анализ во французском эвтрофном озере выявил заметную сезонную динамику численности ALN от 8.от 0 ± 3,8 × 10 4 до 9,0 ± 0,5 × 10 7 мл -1 (рис. 9) и предполагает жесткий контроль параметров окружающей среды на ALN. Относительные пропорции каждого морфотипа смещались одновременно с колебаниями общей численности ALN. 11-лучевая форма оказалась единственной формой в условиях наименьшей плотности ALN, что позволяет предположить, что эта своеобразная форма может быть более устойчивой к неблагоприятным факторам окружающей среды, чем другие формы. Обратная корреляция между 11-лучевыми формами и другими формами, также отмеченная при поддержании ALN в течение 36 дней в озерной воде, свободной от прокариот (в лабораторных условиях), предполагает, что эти формы могут иметь значение для поддержания постоянного пула ALN в озерной воде. и в содействии распространению наночастиц, когда условия роста становятся более благоприятными.Это предположение возможно только в том случае, если предположить, что плеоморфизм возникает в результате взаимопревращения между морфотипами. Идея о том, что все морфотипы, описанные в этом исследовании, развиваются из одной и той же «основной сущности», не доказана и остается фундаментальным вопросом, который предстоит решить в будущем. Необходимо также учитывать важность дегенерации или голодания ALN, контролируемых факторами окружающей среды, которые могут по-разному влиять на обилие морфотипов ALN как в контролируемых, так и in situ условиях.О такой регулирующей функции факторов окружающей среды сообщалось в случае ультрамикробактерий (Duda et al., 2012) и в случае Phaeodactylum tricornutum , диатомей размером 10 мкм (He et al., 2014).

Идентификация ALN в тропической эстуарной системе и в реке Салум в Сенегале (неопубликованные данные J.C.) показывает пангеографическое распространение и адаптируемость ALN. Это свойство побудило нас исследовать параметры окружающей среды, потенциально влияющие на динамику ALN в пространственном масштабе.Это было достигнуто на 16 выбранных географических станциях в эстуарии бухты Халонг во Вьетнаме, сильно пространственно контрастной среде, ранее описанной Pradeep Ram et al. (2018). Это пространственное исследование показало значительную связь между ALN и численностью прокариот (рис. 10). Достоверной корреляции с физико-химическими переменными среды бухты установить не удалось. Напротив, во Французском озере не было зафиксировано тесной связи между ALN и численностью прокариот в сезонном масштабе.Однако в этой среде ALN продемонстрировали ограниченный плеоморфизм и изменения численности в бесклеточной среде по сравнению с анализами in situ (коэффициент умножения 3,6 в бесклеточной среде по сравнению с 60 во French Lake). Эти данные свидетельствуют о том, что микробные сообщества могут способствовать динамике наночастиц. Интересно, что более подробные наблюдения за микробными сообществами, собранными в эвтрофных озерах, выявили опосредованные руками контакты между ALN и бактериями (рис. 11). Роль микробных сообществ в контроле ALN и функциональное значение наблюдаемых контактов между ALN и бактериями до сих пор неясны.Дальнейшие экологические исследования этих загадочных наночастиц следует проводить в контексте экосистемных отношений между ALN и прокариотами, а также между ALN и другими биологическими или физико-химическими компонентами.

Рисунок 11. (A–C) , Электромикрофотографии, подтверждающие предполагаемое взаимодействие между звездообразными наночастицами (ALN) и микробными клетками. (A’-C’) представляют собой увеличенные изображения секций, обозначенных стрелками в (A-C) . Обратите внимание на тесный контакт между плечами ALN и микробными клетками.Шкала баров = 100 нм.

Сезонная и пространственная динамика являются характеристикой водных микробных сообществ, которые регулируют потоки энергии и вещества в водных системах (Weinbauer, 2004; Diao et al., 2017). Насколько нам известно, в настоящее время отсутствуют долгосрочные текущие исследования экологии и динамики популяций нанобов или неживых частиц. Это исключает любое сравнение с нашими исследованиями ALN. Тем не менее наши наблюдения однозначно ставят вопрос об экологической значимости АЛН в функционировании водных экосистем.Несмотря на то, что биомасса всех ALN в период цветения уменьшена в единицах измерения, вероятно, она мобилизует циркулирующие минеральные и органические питательные вещества за счет (конкуренции?) других микробных сообществ водных экосистем. Кроме того, прямое взаимодействие с бактериями (рис. 11) может существенно влиять на энергетические и материальные потоки, опосредуемые прокариотическими компартментами.

Заключение

Это исследование впервые показывает, что водные экосистемы могут содержать обильные и динамичные наночастицы нового типа с экологическим потенциалом, особенно в мезо- и эвтрофных водах, которые являются предпочтительными местами для обнаружения ALN.Хотя вопрос о живой или неживой природе ALN в настоящее время остается нерешенным, их исходные особенности вновь открывают дискуссию о минимальном объеме клетки для самодостаточной формы жизни. Продолжаются эксперименты по изучению точной природы ALN и выявлению биотических и абиотических факторов, участвующих в регуляции их динамики в микрокосме и условиях окружающей среды. В этом контексте предстоящей задачей будет получение массовых культур частиц ALN, выращенных в среде без VLP, EV и прокариот.Ясно, что мы описали новые типы экологических наночастиц, которые, как наиболее экологический результат, подчеркивают, что не все вирусоподобные частицы, наблюдаемые в водных системах, обязательно являются вирусами и что в природных водах может быть несколько типов других сверхмалых частиц, которые в настоящее время неизвестны, но потенциально экологически важны.

Заявление о доступности данных

Наборы данных, созданные для этого исследования, доступны по запросу соответствующему автору.

Вклад авторов

JC и HB выполнили эксперименты и проточный цитометрический анализ. JC провел анализ с помощью просвечивающей электронной микроскопии. С.Б. выполнил анализ методом криотрансмиссионной электронной микроскопии. ChB и LG выполнили анализ с помощью сканирующей электронной микроскопии. KB и NM выполнили анализы EFTEM и EELS. JC, GI, MF и AP проанализировали образцы из залива Халонг. FE, CoB и VG провели геномный анализ. JC, HB, TS-N и BV разработали исследование и написали рукопись.Все авторы прочитали, прокомментировали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Финансирование

FE был поддержан Рамочной программой исследований и инноваций EUed Horizon 2020 (Virus-X, проект № 685778). Это исследование является вкладом в проект C NO LIMIT, финансируемый Междисциплинарной миссией Французского национального центра научных исследований (CNRS) Программа X-life, издание 2018 года. Финансирование отбора проб в бухте Халонг было получено через французско-вьетнамское партнерство Hubert Curien (контракт №№ 23971ТК) и Министерством науки и технологий Вьетнама (Контракт № 46/2012/HD-NDT).

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Это исследование было поддержано платформой CYSTEM UCA-PARTNER (Университет Клермон-Овернь УЦА), Клермон-Ферран, Франция) и лабораторией Microorganisms: Genome and Environment (LMGE, UMR6023 CNRS-UCA, Клермон-Ферран, Франция).В этой работе также помогла платформа многомасштабной электронной визуализации (METi) в CBI (Тулуза, Франция), Технологический центр микроструктур (CTµ) (Виллербанн, Франция) и платформа секвенирования GENTYANE (Клермон-Ферран, Франция). Франция). Авторы благодарят Центр Imagerie Cellulaire Santé УЦА (УЦА, Клермон-Ферран) за помощь в интеркалибровке микроскопии. Мы благодарим Анну Катрин Леур (LMGE) и Гийома Борреля (BECM, Институт Пастера, Париж, Франция) за полезные комментарии и обсуждения рукописи, а также Матье Лежандра (IGS, UMR7256 Aix Marseille Université-CNRS, Марсель, Франция) за помощь в сборка данных последовательности.Мы также благодарим двух рецензентов за их комментарии и предложения, которые значительно повысили качество этой рукописи.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2019.02376/full#supplementary-material

.

Дополнительный лист данных 1. Контиги из матриц ДНК, обогащенных ALN.

Ссылки

Абрахао, Дж., Силва, Л., Силва, Л.С., Халил, Дж. И. Б., Родригес, Р., Арантес, Т., и соавт. (2018). Хвостатый гигантский Тупанвирус обладает наиболее полным трансляционным аппаратом из известных виросфер. Нац. Коммуна . 9:749. doi: 10.1038/s41467-018-03168-1

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Altschul, S.F., Madden, T.L., Schäffer, A.A., Zhang, J., Zhang, Z., Miller, W., et al. (1997). Gapped BLAST и PSI-BLAST: новое поколение программ поиска белковых баз данных. Рез. нуклеиновых кислот .25, 3389–3402. дои: 10.1093/нар/25.17.3389

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Бензерара К., Менги Н., Гайо Ф., Доминичи Д. и Жилле П. (2003). Нанобактериоподобные монокристаллы кальцита на поверхности метеорита Татахуин. Проц. Натл. акад. науч. США 100, 7438–7442. doi: 10.1073/pnas.0832464100

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Бензерара К., Миллер В. М., Барелл Г., Кумар В., Миот Дж., Brown, G.E. Jr., et al. (2006). Поиск микробных сигнатур в человеческих и микробных кальцификациях с использованием мягкой рентгеновской спектромикроскопии. J. Исследование. Мед . 54, 367–379. дои: 10.2310/6650.2006.06016

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Биллер, С. Дж., Макдэниел, Л. Д., Брейтбарт, М., Роджерс, Э., Пол, Дж. Х., и Чисхолм, С. В. (2017). Мембранные везикулы в морской воде: неоднородное содержание ДНК и последствия для оценок численности вирусов. ISME J. 11, 394–404. doi: 10.1038/ismej.2016.134

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Borrel, G., Joblin, K., Guedon, A., Colombet, J., Tardy, V., Lehours, A.C., et al. (2012). Methanobacterium lacus sp . nov., выделенный из глубинных отложений пресноводного меромиктического озера. Междунар. Дж. Сист. Эвол. Микробиол . 62, 1625–1629. doi: 10.1099/ijs.0.034538-0

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Браун, К.T., Hug, L.A., Thomas, B.C., Sharon, I., Castelle, C.J., Singh, A., et al. (2015). Необычная биология в группе, включающей более 15% доменных бактерий. Природа 523, 208–211. doi: 10.1038/nature14486

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Brussaard, CP (2004). Оптимизация процедур подсчета вирусов методом проточной цитометрии. Заяв. Окружающая среда . Микробиол . 70, 1506–1513. doi: 10.1128/AEM.70.3.1506-1513.2004

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Бухфинк Б., Се К. и Хьюсон Д. Х. (2015). Быстрое и чувствительное выравнивание белков с помощью DIAMOND. Нат . Методы . 12, 59–60. doi: 10.1038/nmeth.3176

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Кастель, С. Дж., Браун, С. Т., Анантараман, К., Пробст, А. Дж., Хуанг, Р. Х., и Банфилд, Дж. Ф. (2018). Биосинтетическая способность, метаболическое разнообразие и необычная биология в излучении CPR и DPANN. Нац. Ред. 16, 629–645. doi: 10.1038/s41579-018-0076-2

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Чин, К.С., Александр, Д.Х., Маркс, П., Кламмер, А.А., Дрейк, Дж., Хайнер, К., и соавт. (2013). Негибридные, готовые сборки микробного генома из давно прочитанных данных секвенирования SMRT. Нат . Методы . 10, 563–569. doi: 10.1038/nmeth.2474

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Чизани Г., Варальдо П.Э., Ингианни А., Помпеи Р. и Сатта Г. (1984). Ингибирование цитопатического эффекта, вызванного вирусом простого герпеса, модифицированными лизоцимами куриного яичного белка. Курс. микробиол. 10, 35–40. дои: 10.1007/BF01576045

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Дар, М.А., Шарма, А., Мондал, Н., и Дхар, С.К. (2007). Молекулярное клонирование генов ДНК-гиразы Plasmodium falciparum , нацеленных на апикопласты: уникальная внутренняя АТФазная активность и АТФ-независимая димеризация субъединицы Pf GyrB. Эукариот . Сотовый 6, 398–412. doi: 10.1128/EC.00357-06

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Диао, М., Синниге, Р., Калбитц, К., Хуисман, Дж., и Мюйзер, Г. (2017). Сукцессия бактериальных сообществ в сезонно-стратифицированном озере с бескислородным и сульфидным гиполимнионом. Перед. микробиол. 8:2511. doi: 10.3389/fmicb.2017.02511

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Дуда В.И., Сузина Н.Е., Поливцева В.Н., Боронин А.М. (2012). Ультрамикробактерии: формирование понятия и вклад ультрамикробактерий в биологию. Микробиология 81, 379–390. дои: 10.1134/S0026261712040054

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Engle, E.C., Manes, S.H., and Drlica, K. (1982). Дифференциальные эффекты антибиотиков, ингибирующих гиразу. Дж . Бактериол . 149, 92–98.

Академия Google

Фолк, Р.Л. (1993). СЭМ-изображение бактерий и нанобактерий в карбонатных отложениях и горных породах. Дж . Осадок Res . 63, 990–999. дои: 10.1306/D4267C67-2B26-11D7-8648000102C1865D

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Фортерре П., Солер Н., Крупович М., Марге Э. и Акерманн Х.В. (2013). Поддельные вирусные частицы, полученные с помощью флуоресцентной микроскопии. Тенденции микробиол. 21, 1–5. doi: 10.1016/j.tim.2012.10.005

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Гунейм, Л.Дж., Джонс Д.Л., Голышин П.Н., Голышина О.В. (2018). Наноразмерные и фильтруемые бактерии и археи: биоразнообразие и функции. Перед. микробиол. 9:1971. doi: 10.3389/fmicb.2018.01971

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Гриффин, С., Масуд, М. И., Насим, М. Дж., Сарфраз, М., Эбокайве, А. П., Шефер, К. Х., и соавт. (2018). Натуральные наночастицы: особое вещество, вдохновленное природой. Антиоксиданты 7:3. дои: 10.3390/антиокс7010003

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Херинг М., Вестергард Г., Рэйчел Р., Чен Л., Гаррет Р. А. и Прангишвили Д. (2005). Вирусология: независимое развитие вируса вне хозяина. Природа 436, 1101–1102. дои: 10.1038/4361101a

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хе, Л., Хан, X., и Ю, З. (2014). Редкий морфотип Phaeodactylum tricornutum крестообразной формы: условия культивирования, трансформация и уникальные характеристики жирных кислот. PLoS ONE 9:e93922. doi: 10.1371/journal.pone.0093922

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хофер Ф., Гроггер В., Котлейтнер Г. и Варбихлер П. (1997). Количественный анализ изображений распределения элементов EFTEM. Ультрамикроскопия 67, 83–103. doi: 10.1016/S0304-3991(96)00106-4

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Хуг, Л. А., Бейкер, Б. Дж., Анантараман, К., Браун, К. Т., Пробст, А. Дж., Кастель, К.Дж. и др. (2016). Новый взгляд на древо жизни. Нат . Микробиол . 1:16048. doi: 10.1038/nmicrobiol.2016.48

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Hyatt, D., Chen, G.L., Locascio, P.F., Land, M.L., Larimer, F.W., and Hauser, L.J. (2010). Prodigal: распознавание прокариотических генов и идентификация сайта инициации трансляции. Биоинформатика BMC 11:119. дои: 10.1186/1471-2105-11-119

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Каяндер, Э.О., Чифтчиоглу Н., Ахо К. и Гарсия-Куэрпо Э. (2003). Характеристики нанобактерий и их возможная роль в камнеобразовании. Урол. Рез . 31, 47–54. doi: 10.1007/s00240-003-0304-7

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Кераваль Б., Леурс А.С., Коломбе Дж., Амблар К., Альварес Г. и Фонтейн С. (2016). Выбросы углекислого газа из почвы контролируются внеклеточным окислительным метаболизмом, определяемым по его изотопной сигнатуре. Биогеонауки 13, 6353–6362. doi: 10.5194/bg-13-6353-2016

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

King, A.M.Q., Lefkowitz, E.J., Mushegian, A.R., Adams, M.J., Dutilh, B.E., Gorbalenya, A.E., et al. (2018). Изменения в таксономии и международном кодексе классификации и номенклатуры вирусов, ратифицированные Международным комитетом по таксономии вирусов (2018 г.). Арка . Вирол . 163, 2601–2631. doi: 10.1007/s00705-018-3847-1

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Крумсик, Дж., Арнольд Р. и Раттей Т. (2007). Gepard: быстрый и чувствительный инструмент для создания точечных диаграмм в масштабе генома. Биоинформатика 23, 1026–1028. doi: 10.1093/биоинформатика/btm039

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Lee-Huang, S., Maiorov, V., Huang, P.L., Ng, A., Lee, H.C., Chang, Y.T., et al. (2005). Структурное и функциональное моделирование лизоцима человека выявило уникальный нонапептид HL9 с активностью против ВИЧ. Биохимия 44, 4648–4655.дои: 10.1021/bi0477081

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лю Ю., Смид Э. Дж., Аби Т. и Нотебаарт Р. А. (2019). Доставка инструментов редактирования генома бактериальными внеклеточными везикулами. Микроб. Биотехнолог . 12, 71–73. дои: 10.1111/1751-7915.13356

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Mackey, B.M., Miles, C.A., Parsons, S.E., and Seymour, D.A. (1991). Термическую денатурацию целых клеток и клеточных компонентов Escherichia coli исследовали методом дифференциальной сканирующей калориметрии. Дж. Генерал . Микробиол . 137, 2361–2374. дои: 10.1099/00221287-137-10-2361

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Манченко Г. П. (1994). Справочник по обнаружению ферментов в гелях для электрофореза . Бока-Ратон, Флорида: CRC Press; Группа Тейлор и Фрэнсис.

Академия Google

Мартель, Дж., и Янг, Дж. Д. (2008). Предполагаемые нанобактерии в крови человека в виде наночастиц карбоната кальция. Проц. Натл. акад. Наука . США 105, 5549–5554. doi: 10.1073/pnas.0711744105

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Мастронард, Д. Н. (2005). Автоматизированная томография с помощью электронного микроскопа с использованием надежного прогнозирования движений образца. J. Структура . Биол . 152, 36–51. doi: 10.1016/j.jsb.2005.07.007

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Маккей Д.С., Гибсон Э.К. и Томас-Кепрта К.Л. (1996). Поиск прошлой жизни на Марсе: возможная реликтовая биогенная активность в марсианском метеорите ALH84001. Наука 273, 924–930. doi: 10.1126/наука.273.5277.924

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Национальный исследовательский совет (1999). Предельные размеры очень мелких микроорганизмов: материалы семинара . Вашингтон, округ Колумбия: Издательство национальных академий.

Академия Google

Ортис-Альварес Р. и Касамайор Э. О. (2016). Высокая встречаемость Pacearchaeota и Woesearchaeota (Archaea superphylum DPANN) в поверхностных водах олиготрофных высокогорных озер. Окружающая среда. Микробиол . Респ. . 8, 210–217. дои: 10.1111/1758-2229.12370

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Pradeep Ram, A.S., Mari, X., Brune, J., Torréton, J.P., Chu, V.T., Raimbault, P., et al. (2018). Бактериально-вирусные взаимодействия в микрослое морской поверхности тропической прибрежной экосистемы с преобладанием черного углерода (залив Халонг, Вьетнам). Элемент. науч. Ант . 6, 2–19. doi: 10.1525/elementa.276

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Прангишвили Д., Vestergaard, G., Häring, M., Aramyo, R., Basta, T., Rachel, R., et al. (2006). Структурно-геномные свойства гипертермофильного археального вируса ATV с внеклеточной стадией репродуктивного цикла. Дж. Мол . Биол . 359, 1203–1216. doi: 10.1016/j.jmb.2006.04.027

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Quast, C., Pruesse, E., Yilmaz, P., Gerken, J., Schweer, T., Yarza, P., et al. (2013). Проект базы данных генов рибосомной РНК SILVA: улучшенная обработка данных и веб-инструменты. Рез. нуклеиновых кислот . 41, Д590–Д596. doi: 10.1093/nar/gks1219

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Raoult, D., Drancourt, M., Azza, S., Nappez, C., Guieu, R., Rolain, J.M., et al. (2008). Нанобактерии представляют собой минерало-фетуиновые комплексы. ПЛОС Патог . 4:e41. doi: 10.1371/journal.ppat.0040041

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Шульц Ф., Ютин Н., Иванова Н. Н., Ортега Д. Р., Ли Т.K., Vierheilig, J., et al. (2017). Гигантские вирусы с расширенным набором компонентов системы трансляции. Наука 356, 82–85. doi: 10.1126/science.aal4657

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Зибурт, Дж., Мак, Н., Сметачек, В., и Ленц, Дж. (1978). Структура пелагической экосистемы: гетеротрофные компартменты планктона и их связь с размерными фракциями планктона. Лимнол. Океаногр . 23, 1256–1263. дои: 10.4319/10.1978.23.6.1256

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Силлито Р.Х., Фолк Р.Л. и Сарич Н. (1996). Бактерии как медиаторы обогащения сульфидов меди при выветривании. Наука 272, 1153–1155. doi: 10.1126/наука.272.5265.1153

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Солер Н., Крупрович М., Марге Э. и Фортерре П. (2015). Мембранные везикулы в естественной среде: главная проблема вирусной экологии. ISME J. 9, 793–796. doi: 10.1038/ismej.2014.184

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Солер Н., Марге Э., Вербавац Дж. М. и Фортерре П. (2008). Вирусоподобные везикулы и внеклеточная ДНК, продуцируемые гипертермофильными археями порядка Thermococcales. Рез. микробиол. 159, 390–399. doi: 10.1016/j.resmic.2008.04.015

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Консорциум ЮниПрот (2019).UniProt: всемирный центр знаний о белках. Рез. нуклеиновых кислот. 47, Д506–Д515. doi: 10.1093/nar/gky1049

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Увинс, П.Дж., Уэбб, Р.И., и Тейлор, А.П. (1998). Новые наноорганизмы из австралийских песчаников. утра. Минерал . 83, 1541–1550. doi: 10.2138/am-1998-11-1242

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Wu, C.Y., Martel, J., Wong, T.Y., Young, D., Liu, C.C., Lin, C.W., et al.(2016). Формирование и характеристика биомиметических минерало-органических частиц в природных поверхностных водах. Науч. Респ. 6:28817. дои: 10.1038/srep28817

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Wurch, L., Giannone, R.J., Belisle, B.S., Swift, C., Utturkar, S., Hettich, R.L., et al. (2016). Геномная изоляция и характеристика симбиотической системы наноархеот из наземной геотермальной среды. Нац. коммун. 7:12115.doi: 10.1038/ncomms12115

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ягоби, С., Моджтаба, Б., Самией, Н., и Джахедманеш, Н. (2015). Что такое нанобактерии? Биотехнолог. Биотехнолог .

Leave a Reply

Ваш адрес email не будет опубликован.

2019 © Все права защищены.